Моу аббревиатура расшифровка: как расшифровывается аббревиатура,школа расшифровка и что она означает

Содержание

МОУ — это… Что такое МОУ?

  • МОУ — МОУ  сокращение, имеющее несколько значений: МОУ  муниципальное образовательное учреждение. Например  Средняя образовательная школа (СОШ). Смотри Образовательное учреждение и Средняя школа МОУ  Малый областной университет.… …   Википедия

  • МОУ ЛГ — муниципальное образовательное учреждение Лингвистическая гимназия http://www.gimnasium70.narod.ru/​ образование и наука …   Словарь сокращений и аббревиатур

  • МОУ ФК — Межрегиональное операционное управление Федерального казначейства организация, фин …   Словарь сокращений и аббревиатур

  • МОУ — массированный огневой удар межтерриториальные органы управления местные органы управления …   Словарь сокращений русского языка

  • МОУ (значения) — МОУ  сокращение, имеющее несколько значений: МОУ  муниципальное образовательное учреждение. Например  Средняя образовательная школа (СОШ).

    Смотри Образовательное учреждение и Средняя школа МОУ  Малый областной университет.… …   Википедия

  • МОУ ЦЗУНСАНЬ —     МОУ ЦЗУНСАНЬ (МоуЛичжун) (12 июня 1909, Цися, провинция Шаньдун апрель 1995, Тайбэй, Тайвань) китайский философ, лидер движения нового конфуцианства в послевоенный период. Родился в крестьянской семье, в 1933 закончил философский факультет… …   Философская энциклопедия

  • МОУ \»Палласовская СОШ №11\ — Девиз: От …   Википедия

  • МОУ СОШ №45 (Волгоград) — Файл:Shcola2.jpg Основана: 1977 Директор: Карпилянская Людмила Александровна Тип: средняя общеобразовательная школа Учеников: 1500 Адрес: Россия, 40012 …   Википедия

  • МОУ лицей №1 Красноармейского района г.Волгограда — У этого термина существуют и другие значения, см. Лицей № 1. МОУ лицей № 1 Красноармейского района г. Волгограда  муниципальное образовательное учреждение обеспечивающее повышенный уровень …   Википедия

  • МОУ СОШ № 16 (Дзержинск) — Муниципальное общеобразовательное учреждение средняя общеобразовательная школа № 16 поселка Горбатовка Основана: 1939 Директор: Миронова Татьяна Витальевна Тип …   Википедия

  • МОУ СОШ – расшифровка: что обозначает и как правильно расшифровывается аббревиатура

    В современном языке прочно «укоренились» сокращенные слова.

    Особенно распространены акронимы или звуковые аббревиатуры. Об одном из таких сокращений пойдет речь в настоящей статье.

    Как расшифровать МОУ СОШ

    Всякий человек, который хотя бы раз в жизни сталкивался с системой школьного образования современной России, должен был встретить аббревиатуру, обозначенную в заголовке статьи.

    Важно! Как подготовиться к ЕГЭ по истории с нуля: какие материалы нужно использовать и что нужно знать

    И, наверное, не сразу можно сказать, что же означают эти шесть букв.

    Сначала углубимся в тонкости русского языка и оговоримся, что данный вид аббревиатуры относится к акронимам. Они произносятся как единое слово.

    Интересно! Получаем полное образование: куда можно поступить после 9 класса в Перми

    Теперь обратимся к первой части. Что значит сочетание трех букв? А это есть не что иное, как школа. Но в современном языке все понятные всем «школы» стали муниципальными, потому что находятся в ведении муниципалитетов, образовательными, потому что не просто дают детям знания, а оказывают образовательные услуги, учреждениями, потому что их учредили их.

    Важно! Таким образом, МОУ это муниципальное образовательное учреждение.

    Теперь обратимся ко второй части. Расшифровка простая: «С» – средняя, «О» – общеобразовательная, «Ш» – школа.

    Подводя итоги, скажем, что полая расшифровка выглядит: муниципальное общеобразовательное учреждение средняя общеобразовательная школа.

    Как пишется

    Выражение пишется следующим образом:

    1. Все буквы при написании должны быть заглавными.
    2. Аббревиатура состоит из двух сокращений МОУ и СОШ.
    3. Если у учебного заведения есть номер, то запись выглядит так: МОУ СОШ № 34.
    4. Если учебное заведение имеет название, то тогда примером записи может являться такая: МОУ Заиграевская СОШ.

    Вполне понятно, что при современном, все более убыстряющемся темпе жизни и речь тоже должна быть быстрой. Но, как говорится, все должно быть в меру. Избыточные сокращения ведут к тому, что человек становится неспособным выразить мысль красиво полными словами и фразами.

    Познавательно!На кого и куда можно поступить после окончания 11 класса девушке

    Полезное видео

    Подведем итоги

    Теперь мы знаем, как расшифровывается МОУ СОШ. Аббревиатура должна употребляться лишь на письме, потому что имеет достаточно громоздкую расшифровку. А в повседневной речи лучше сказать школа. Это будет понятнее слушающим и не пресытит речь говорящего малопонятными сокращениями. Также не стоит забывать, что основными требованиями к звучащей речи, должны быть ясность и лаконичность.

    «МОУ СОШ» — Tolkovnik.ru — растолкуем любое сокращение!

    Расшифровка аббревиатуры:

    «МОУ СОШ»

    Транскрипция сокращения: Транслитерация: MOU SOSH

    Случайное сокращение: «КППАО» Расшифровка аббревиатуры: «КППАО» Красноярское производственное пассажирское автотранспортное объединение Транскрипция сокращения: …

    Случайное сокращение: «НчГРЭС» Расшифровка аббревиатуры: «НчГРЭС» Новочеркасская государственная районная электростанция Новочеркасская ГРЭС Новочеркасская государственная районная электро …

    Случайное сокращение: «Главлесосбыт» Расшифровка аббревиатуры: «Главлесосбыт» Главное управление по сбыту продукции лесозаготовительной и лесопильно-деревообрабатывающей промышленности Транскри …

    Случайное сокращение: «ОСИА» Расшифровка аббревиатуры: «ОСИА» агентство по испекциям на местах Транскрипция сокращения: …

    Случайное сокращение: «МТСК» Расшифровка аббревиатуры: «МТСК» Московский территориальный строительный каталог Московская теплосетевая компания Мордовская теплосетевая компания Транскрип . ..

    Случайное сокращение: «ПТГрП» Расшифровка аббревиатуры: «ПТГрП» родственный паратгормону протеин Транскрипция сокращения: …

    Случайное сокращение: «МАБ СНГ» Расшифровка аббревиатуры: «МАБ СНГ» Международная ассоциация бирж СНГ Транскрипция сокращения: …

    Случайное сокращение: «КРДМОО» Расшифровка аббревиатуры: «КРДМОО» Калининградская региональная детско-молодежная общественная организация Транскрипция сокращения: …

    Случайное сокращение: «Руспродсоюз» Расшифровка аббревиатуры: «Руспродсоюз» Ассоциация производителей и поставщиков продовольственных товаров Транскрипция сокращения: …

    Случайное сокращение: «ВНИИГПЭ» Расшифровка аббревиатуры: «ВНИИГПЭ» Всероссийский научно-исследовательский институт государственной патентной экспертизы Транскрипция сокращения: …

    «АКОД» — slova365.ru — расшифровка любых сокращение!

    Расшифровка аббревиатуры:

    «АКОД»

    автоматизированный комплекс обработки данных

    алтайское краевое общественное движение

    автоматизированный каталог океанографических данных

    Транскрипция сокращения: Транслитерация: AKOD

    Случайное сокращение: «ИХФ АН СССР» Расшифровка аббревиатуры: «ИХФ АН СССР» Институт химической физики Академии наук СССР Транскрипция сокращения: . ..

    Случайное сокращение: «ЦНИЛБП» Расшифровка аббревиатуры: «ЦНИЛБП» Центральная научно-исследовательская лаборатория бродильной промышленности Транскрипция сокращения: …

    Случайное сокращение: «ЭИКА» Расшифровка аббревиатуры: «ЭИКА» «Энциклопедия измерений, контроля и автоматизации» «Энциклопедия измерений, контроля и автоматизации» Транскрипция сокращения: …

    Случайное сокращение: «РГСН» Расшифровка аббревиатуры: «РГСН» резервуар горизонтальный стальной наземный радиолокационная головка самонаведения Транскрипция сокращения: …

    Случайное сокращение: «ИПСК» Расшифровка аббревиатуры: «ИПСК» индуцированная плюрипотентная стволовая клетка инвестиционная проектно-строительная компания Инновационная промышленно-строи …

    Случайное сокращение: «АТФ» Расшифровка аббревиатуры: «АТФ» агротехнологическая фирма аденозинтрифосфат аденозинтрифосфорная кислота Администрация по контролю за оборотом оружия, алкогол . ..

    Случайное сокращение: «РМОТ» Расшифровка аббревиатуры: «РМОТ» рабочее место оператора-технолога Транскрипция сокращения: …

    Случайное сокращение: «ОШФ» Расшифровка аббревиатуры: «ОШФ» общественный школьный фонд областная шахматная федерация Транскрипция сокращения: …

    Случайное сокращение: «ВСНТО» Расшифровка аббревиатуры: «ВСНТО» Всесоюзный совет научно-технических обществ Транскрипция сокращения: …

    Случайное сокращение: «ИВТ СО РАН» Расшифровка аббревиатуры: «ИВТ СО РАН» Институт вычислительных технологий СО РАН Транскрипция сокращения: …

    «ПОПСУ» — slova365.ru — расшифровка любых сокращение!

    Расшифровка аббревиатуры:

    «ПОПСУ»

    потери электроэнергии, обусловленные погрешностями системы учёта электроэнергии

    Транскрипция сокращения: Транслитерация: POPSU

    Случайное сокращение: «Новосибирскэнерго» Расшифровка аббревиатуры: «Новосибирскэнерго» Новосибирское производственное объединение энергетики и электрификации Транскрипция сокращения: . ..

    Случайное сокращение: «Пальмах» Расшифровка аббревиатуры: «Пальмах» ударные отряды Транскрипция сокращения: …

    Случайное сокращение: «заявл.» Расшифровка аббревиатуры: «заявл.» заявлено; заявление заявлено (в патентоведении) Транскрипция сокращения: …

    Случайное сокращение: «КСУ СС» Расшифровка аббревиатуры: «КСУ СС» комплексная система управления спасательным судном Транскрипция сокращения: …

    Случайное сокращение: «Главсевкавсельстрой» Расшифровка аббревиатуры: «Главсевкавсельстрой» Главное управление сельского строительства в районах Северного Кавказа Транскрипция сокращения: …

    Случайное сокращение: «СРЗК» Расшифровка аббревиатуры: «СРЗК» средний разведывательный корабль Транскрипция сокращения: …

    Случайное сокращение: «ИЭМ НПО «Тайфун»» Расшифровка аббревиатуры: «ИЭМ НПО «Тайфун»» Институт экспериментальной метеорологии научно производственного объединения «Тайфун» Транскрипция сокращения: .
    ..

    Случайное сокращение: «ИТАР» Расшифровка аббревиатуры: «ИТАР» интенсивная терапия, анестезия и реанимация Информационное телевизионное агентство России Транскрипция сокращения: International Tr …

    Случайное сокращение: «ГСКПБ» Расшифровка аббревиатуры: «ГСКПБ» государственное специальное конструкторско-проектное бюро Транскрипция сокращения: …

    Случайное сокращение: «РЛС СА» Расшифровка аббревиатуры: «РЛС СА» радиолокационная станция с синтезированной аппаратурой Транскрипция сокращения: …

    моу расшифровка аббревиатуры — 20 рекомендаций на Babyblog.ru

    Рутины, целый день рутины, без них никуда — это и посуду помыть, и стиолы протереть и все-все-все, что каждый день делает каждая хозяйка.

    Расхламления — сегодня это место с пакетами между стеной и холодильником, немного хс на самом холодильнике, ну и протерла его снаружи. Мин. 10-15 заняло.

    ЕЧУ …(Уже чувствую себя как в секте, знаю расшифровки аббревиатур  ФЛ, КЖ, ЗК, ЕЧУ ).

    Итак, ЕЧУ или Час благословения жилища, но для меня час — это мало, без перфекционизма мне пока никак, иначе я со своим бардаком до пенсии не уберусь ) Так что ЕЧУ для меня это не еженедельный час уборки, а по простому говоря будет —

    Генеральная уборка!!! (пусть и отступление от системы).

    ЕЧУ:

    Надо будет делать то, что не сделано по системе на неделе. А именно:

    — разобрать по местам валявшиеся вещи

    — навести образовавшийся беспорядок в шкафах

    — протереть фасады мебели, двери, зеркала, окна с внутренней стороны и т.п.

    — глажка!!! (не любимое!!!)

    — стирка покрывал, штор (реже чем раз в неделю)

    — смена постельного белья, полотенец

    — затариться продуктами и прочим для хозяйства

    — и т.д. (потом допишу по ходу дела).

    _____________________________________________________________

    И еще я определила для себя где всегда НАДО поддерживать порядок, ибо там он образовывается незаметно:

    Хс  Расхламленив

    — Аптечка

    — Косметика

    — Инструменты, шурупы, провода, лампочки

    — Документы, инструкции, квитанции

    — Шкатулка с нитками, иглами, пуговицами и т. п.

    — Коробка с рукоделием

    — Бумаги мои для работы, учебы

    — и т.д. (потом вспомню, допишу)

    ______________________________________________________________

    ЗК — раковины у меня в ванной нет. Сегодня протерла кран в ванной и саму ванну, зеркало и полку около него.

    + подписалась на еженедельную эстафету. Несмотря на то, что унитаз у меня — это ежедневная рутина, я его сегодня генералила и избавилась от известкового налета на нем (благодаря Утенку черному).

    как переводится МБОУ СОШ ? 

    Зарубижная литература. Срочно!!! Драматургія кінця ХІХ – початку ХХ ст. … І рівень Виберіть правильний варіант відповіді (0,5 б.) 1. Засновником «нової драми» вважають: а) А.Чехова; б) Б.Шоу; в) М.Метерлінка; г) Г.Ібсена.2. П’єса «Ляльковий дім» за жанром: а) сатирична комедія; б) соціально-побутова трагедія; в) п’єса-дискусія; г) соціально-психологічна драма.3. Визначте, які риси характеру не притаманні Торвальду Хельмеру: а) жорстокість та егоїзм; б) хвальковитість та лицемірство; в) компромісність та розуміння; г) самовпевненість та кар’єризм.

    4. Основна проблема п’єси Б.Шоу «Пігмаліон»: а) кохання і родина; б) доля таланту в мистецтві; в) кар’єризм та підприємливість; г) освіта й виховання.5. Головна героїня п’єси Б.Шоу «Пігмаліон» на початку твору вирізнялася: а) не зовсім чесним ставленням до покупців; б) пихатістю, грубістю; в) жахливою вимовою; г) лагідністю, відкритістю.6. Яку мету поставив перед собою Гіггінс, розпочавши роботу з Елайзою? а) зробити з квіткарки герцогиню; б) допомогти дівчині здобути хорошу кар’єру; в) здобути собі хорошу репутацію; г) створити для себе ідеальну жінку. ІІ рівень Дайте відповіді на запитання (1 б.)1. Поясніть сенс назви твору Г.Ібсена «Ляльковий дім».2. Хто такий Пігмаліон? Хто і чому є Пігмаліоном у драмі Б.Шоу?3. Ознаки яких жанрів поєднано у п’єсі Б.Шоу «Пігмаліон»? ІІІ рівень Дайте визначення (1 б.)1. Ознаки «нової драми» у п’єсі Б.Шоу «Пігмаліон».2. Сформулюйте тему та ідею твору Г.Ібсена «Ляльковий дім». Доповніть визначення (1 б.)3. Драматичний твір, у якому відображено зіткнення внутрішніх прагнень героя із соціальними обставинами, глибоко розкрито психологію персонажів, показано стан суспільства та його вплив на духовний світ людей – це… ІV рівень Напишіть творчу роботу на одну з поданих тем.1. Що таке, на вашу думку, кохання? Чи було справжнє кохання у домі Хельмерів?2. Трагізм долі Елайзи у п’єсі Б.Шоу «Пігмаліон».3. Значення досконалого володіння мовою для успішного життя ( за п’єсою Б.Шоу «Пігмаліон» та на основі особистих спостережень за сучасним життям).4. Моральні уроки твору Г.Ібсена «Ляльковий дім».​

    как получить много баллов имея свой мозг и не имея интернета халявный балл ​

    Создать свой сборник шуток проанализировать языковую игру в них. Без мата

    по какому закону в Российской Федерации в городе Москва,обязаны продавцы магазинов продавать энергетические напитки без паспорта несовершеннолетним

    як ставился містер Вонка до дорослих?

    На чому тривала Подорож по шоколадній річці? Срочно плиз

    Напиши следующую программу без использования арифметической операции «возведение в степень». Пользователь вводит положительное число. Если это число м … ожно представить в виде степени двойки — программа выводит “Число можно разложить в степень двойки”, иначе — “Число нельзя разложить в степень двойки”. Оператор if-else должен быть вне цикла.

    Создать свой сборник шуток проанализировать языковую игру в них.

    Потпишитись пожалуйста на мой ютуб канал (OvEn ArTuR)​

    Срочно! Помогите с испанским, прошу!

    Аббревиатура / Подробная информация.

    — Allie: аббревиатура / полная информация.

    ■ Поиск аббревиатуры и полной формы


    Что такое Элли?

    Allie — это служба поиска сокращений и полных форм, используемых в Lifeciences. Это решение проблемы, связанной с использованием в литературе множества сокращений, часто встречаются многозначные или синонимичные сокращения, затрудняет чтение и понимание научных статей, которые не имеют отношения к опыту читателя.Элли ищет сокращения и соответствующие им длинные формы в заголовках и рефератах во всей базе данных PubMed® Национальной медицинской библиотеки США. PubMed хранит более 30 миллионов библиографических данных по наукам о жизни и подходит для извлечения аббревиатур по конкретным предметным областям и их полных форм, встречающихся в реальной литературе.

    Что могут делать пользователи с помощью Allie?
    • Пользователи могут искать длинные формы сокращений или сокращения длинных форм.
    • Можно получить библиографические данные, которые включают запрашиваемое сокращение или полную форму в заголовках или рефератах.
    • Пользователи также могут получать одновременно встречающиеся сокращения в заголовках и рефератах.
    • Доступны интерфейсы SPARQL / REST / SOAP, которые позволяют пользователям обращаться к Allie из своих скриптов, программ и т. Д.
    Видеоурок

    Вы можете изучить Allie здесь (видеоурок).

    Связанная публикация

    См. Следующую публикацию:
    Y.Ямамото, А. Ямагути, Х. Боно и Т. Такаги, «Allie: база данных и служба поиска сокращений и полных форм.», База данных, 2011: bar03.
    PubMed Entry | Доступен полный текст статьи

    Элли использует ALICE для извлечения пар сокращений и длинных форм вместе с идентификатором PubMed из данных PubMed. Подробности этого инструмента описаны в следующей публикации:
    H. Ao и T. Takagi, «ALICE: алгоритм извлечения сокращений из MEDLINE.», J Am Med Inform Assoc., 2005 сентябрь-октябрь; 12 (5) : 576-86.
    PubMed Entry | Доступен полный текст статьи

    Обновление

    Последнее обновление индекса: 31 марта 2021 г. (ежемесячное обновление)

    Загрузить

    Вы можете загрузить и использовать базу данных, используемую для Allie (Еженедельное обновление), в соответствии с условиями использования. [скачать сайт]


    [РЕЗУЛЬТАТЫ]
    Запрос (сокращение / полная форма) 2′-моэ / 2′-о- (2-метокси) этил
    Аббревиатура / Подробный поиск информации не найдено.

    Пожалуйста, обращайтесь сюда, если у вас есть какие-либо вопросы или предложения.


    Таблицы и аттестаты средней школы

    Стенограмма — это официальный список оценок и зачетных единиц вашей средней школы (старшей школы), полученных в рамках выпускной программы Британской Колумбии.

    Выпускной сертификат , иногда называемый дипломом или «Кизил», является вашим официальным выпускным документом.

    Стенограммы доступны для онлайн-заказа

    У нас есть ваша стенограмма, если вы посещали среднюю школу в Британской Колумбии или на территории Юкона, и вы:

    • Окончил курс 12 класса после 1986 , или
    • Учился в 12 классе до 1974 поступил в университет или по учебно-технической программе

    Ваша стенограмма включает:

    • Список курсов, которые вы успешно закончили в рамках выпускной программы Британской Колумбии
    • Получено наград
    • Участие в одной или нескольких специальных программах
    • Выпускной
    • Текущие оценки и кредиты за 10–12 классы вашей выпускной программы
      • Если вы участвуете в текущей выпускной программе (называемой выпускной программой 2004 года), будут учтены классы с 10 по 12.
      • Если вы участвуете в другой выпускной программе (например, выпускной программе для взрослых или других выпускных программах до 2004 года), будут указаны 11 и 12 классы.

    Сертификаты

    Ваш BC Сертификат по программе Graduation Program можно заказать онлайн, если вы закончили обучение в Британской Колумбии после 1985 года.

    Сертификат об окончании школы , который иногда называют «вечнозеленым», можно заказать через Интернет, если вы закончили школу в Британской Колумбии после 1993 года.

    Услуги для нынешних студентов

    Вы получите свидетельство об окончании школы бесплатно после того, как выполните требования для получения диплома. Дополнительные копии можно заказать с помощью службы StudentTranscripts по цене 10 долларов за штуку.

    Отправка стенограмм в высшие учебные заведения

    Чтобы облегчить переход из средней школы в высшее, ваши стенограммы могут быть отправлены в различные университеты, колледжи и институты.

    Выберите ваши высшие учебные заведения (PSI) с помощью службы StudentTranscripts в период с ноября по июнь вашего выпускного учебного года. Примечание: результаты августовских провинциальных экзаменов не доступны к сентябрьскому зачислению в высшие учебные заведения

    Как заказать или отправить стенограмму в учреждение послешкольного образования

    Если ваша школа внесла исправления в вашу стенограмму и вашему PSI требуется исправленная версия, отправьте нам запрос по адресу studenttranscripts @ gov.bc.ca.

    Вы можете разрешить третьей стороне (например, компании, запрашивающей подтверждение вашего образования) безопасно загрузить электронную копию вашей транскрипции.

    Как отправить выписку работодателю, себе или кому-либо

    Услуги для бывших студентов

    Министерство образования будет иметь вашу стенограмму только для , если вы посещали среднюю школу в Британской Колумбии или на территории Юкон, а вы

    • Закончил курс 12 класса после 1986 года, или
    • До 1974 посещал 12-й класс по программе поступления в университет или по учебно-технической программе

    Сделайте онлайн-заказ в StudentTranscripts Service

    Министерство образования не имеет ваших документов , если вы:

    • Окончил (или закончил бы) с января 1974 г. по декабрь 1985 г.
    • Не посещал 12 класс
    • Не получили ваш сертификат (или диплом), когда вы закончили
    • Учился в 12 классе до 1974 г. и не участвовал в поступлении в университет или по учебно-технической программе
    • Требуется сертификат территории Юкон

    Если у министерства нет вашей академической справки, вам нужно будет связаться с вашим учебным заведением или офисом школьного округа.

    Вы можете разрешить третьей стороне (например, компании, запрашивающей подтверждение вашего образования) безопасно загрузить электронную копию вашей транскрипции.

    A Постоянная студенческая книжка (PSR) документирует историю вашей образовательной программы. Ваш PSR хранится либо в последней школе, которую вы посещали, либо в офисе школьного округа. Вы можете запросить PSR по следующим причинам:

    • Для документирования оценок за курсы, которых нет в вашей транскрипте (в большинстве транскриптов показаны результаты только из 11 и 12 классов)
    • Для подтверждения вашего посещения школы
    • Для подтверждения языка обучения (также может потребоваться справка из школы)
    • Документировать любую другую информацию о вашей программе обучения

    df060002547p

    % PDF-1.4 % 52 0 объект > эндобдж 54 0 объект > поток 2000-06-02T21: 46: 40ZParlance Publisher 5.0 / (Xyvision Postscript Formatter) 3.0 32021-04-25T11: 38: 40-07: 002021-04-25T11: 38: 40-07: 00 Acrobat Distiller Command 3.02b для Solaris 2.3 и более поздние (SPARC) приложение / pdf

  • df060002547p
  • uuid: 1c27a030-1dd2-11b2-0a00-b808277d8900uuid: 1c27a032-1dd2-11b2-0a00-d30000000000 конечный поток эндобдж 11 0 объект > эндобдж 1 0 obj > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> эндобдж 12 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> эндобдж 16 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >> эндобдж 20 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >> эндобдж 27 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >> эндобдж 31 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >> эндобдж 35 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >> эндобдж 38 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> эндобдж 41 0 объект > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Type / Page >> эндобдж 55 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / Type / Page >> эндобдж 84 0 объект [91 0 R 92 0 R 93 0 R 94 0 R 95 0 R 96 0 R 97 0 R] эндобдж 85 0 объект > поток q 539.3594055 0 0 83.3014526 31.8202972 651.6985474 см / Im0 Do Q BT / T1_0 1 Тс 10 0 0 10 105,56989 535,99982 тм (2000; 6: 2547-2555.) Tj / T1_1 1 Тс -7.55699 0 Тд (Clin Cancer Res \ 240) Tj / T1_0 1 Тс 0 1 ТД (\ 240) Tj 0 1.00001 TD (Уве Зангемейстер-Виттке, Си \ 342н Х. Лич, Роберт А. Оли и др.) / T1_2 1 Тс 0 1 ТД (\ 240) Tj / T1_3 1 Тс 18 0 0 18 30 575,99994 тм (Опухолевые клетки) Tj 7,61294 1 тд (Экспрессия эффективно индуцирует апоптоз) Tj / T1_4 1 Тс -2.94498 0 тд (bcl-xL) Tj / T1_3 1 Тс -2,33398 0 тд (и) Tj / T1_4 1 Тс -2.33398 0 тд (bcl-2) Tj / T1_3 1 Тс Т * (Новый биспецифический антисмысловой олигонуклеотид, ингибирующий оба) Tj ET 30 481 543 35 рэ 0 0 мес. S BT / T1_0 1 Тс 11 0 0 11 120.94202 488.99997 тм (\ 240) Tj / T1_3 1 Тс -7,55696 1 тд (Обновленная версия) Tj ET BT / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 141 480,99994 тм (\ 240) Tj / T1_0 1 Тс 23,56696 1 тд () Tj 0 0 1 рг -23,56696 0 тд (http://clincancerres.aacrjournals.org/content/6/6/2547)Tj 0 г 0 1.00001 TD (См. Самую последнюю версию этой статьи по адресу:) Tj ET BT / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 30 460.99997 Тм (\ 240) Tj 0 1 ТД (\ 240) Tj ET BT / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 30 440,99997 тм (\ 240) Tj Т * (\ 240) Tj ET 30 371 543 70 рэ 0 0 мес. S BT / T1_0 1 Тс 11 0 0 11 120.94202 408.99997 тм (\ 240) Tj / T1_3 1 Тс -6.00198 1 тд (Цитированные статьи) Tj ET BT / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 141 400,99994 тм (\ 240) Tj / T1_0 1 Тс 29.28994 1 Td () Tj 0 0 1 рг -29.28994 0 Тд (http://clincancerres.aacrjournals.org/content/6/6/2547.full#ref-list-1)Tj 0 г 0 1.00001 TD (Эта статья цитирует 29 статей, 10 из которых вы можете получить бесплатно по адресу:) Tj ET BT / T1_0 1 Тс 11 0 0 11 120.94202 378,99997 тм (\ 240) Tj / T1_3 1 Тс -6,33498 1 тд (Цитирование статей) Tj ET BT / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 141 370,99994 тм (\ 240) Tj / T1_0 1 Тс 30.67993 1 тд () Tj 0 0 1 рг -30.67993 0 Тд (http: //clincancerres.aacrjournals.org/content/6/6/2547.full#related-urls \ ) Tj 0 г Т * (Эта статья процитирована в 20 статьях, размещенных на HighWire. Откройте страницу a \ статьи по адресу:) Tj ET BT / T1_2 1 Тс 10 0 0 10 30 350,99997 тм (\ 240) Tj 0 1 ТД (\ 240) Tj ET 30 236 543 115 рэ 0 0 мес. S BT / T1_0 1 Тс 11 0 0 11 120,94 202 318.99997 Тм (\ 240) Tj / T1_3 1 Тс -5.66901 1 тд (Оповещения по электронной почте) Tj ET BT / T1_0 1 Тс 10 0 0 10 295,49969 331 тм (относится к этой статье или журналу.) Tj 0 0 1 рг -15.44997 0 Тд (Зарегистрируйтесь, чтобы получать бесплатные уведомления по электронной почте) Tj ET BT 0 г / T1_0 1 Тс 11 0 0 11 120,94 202 285,99994 тм (\ 240) Tj / T1_3 1 Тс -6.38997 1 тд (Подписки) Tj 0,556 1,00001 тд (Отпечатки и) Tj ET BT / T1_0 1 Тс 10 0 0 10 141 288,99994 тм (\ 240) Tj 13.46497 1 тд (.) Tj 0 0 1 рг -6.85098 0 Тд ([email protected]) Tj 0 г -6.61399 0 Тд (Отделение) Tj 0 1.00001 TD (Чтобы заказать перепечатку этой статьи или подписаться на журнал, свяжитесь с нами \ t Публикации AACR) Tj ET BT / T1_0 1 Тс 11 0 0 11 120.94202 263.99997 тм (\ 240) Tj / T1_3 1 Тс -5.66901 1 тд (Разрешения) Tj ET BT / T1_0 1 Тс 10 0 0 10 141 235,99988 тм (\ 240) Tj 0 1 ТД (Сайт Rightlink.) Tj 0 1.00001 TD (Нажмите «Запросить разрешения», чтобы перейти на страницу защиты авторских прав \ Центр Рэнсиса \ (CCC \)) Tj 23,56696 1 тд (.) Tj 0 0 1 рг -23,56696 0 тд (http://clincancerres.aacrjournals.org/content/6/6/2547)Tj 0 г 0 1 ТД (Чтобы запросить разрешение на повторное использование всей или части этой статьи, используйте это li \ nk) Tj ET BT / T1_0 1 Тс 9 0 0 9 278.74257 1.99997 тм (Исследования) Tj 0,18547 1 тд (25 апреля 2021 г. \ 251 2000 Американская ассоциация рака) Tj 0 0 1 рг -13,61496 0 тд (Clincancerres.aacrjournals.org) Tj 0 г -8.11398 0 Td (Загружено с) Tj ET конечный поток эндобдж 90 0 объект > / Filter / FlateDecode / Height 238 / Length 73913 / Name / X / Subtype / Image / Type / XObject / Width 1541 >> stream HϏn`’G6R0 «#AKH» 9 \ C |

    Полная стенограмма выходного интервью Нила Олши: Генеральный директор Trail Blazers говорит: «У меня нет для вас всех ответов сегодня»

    ТУАЛАТИН — Менее чем через 24 часа после того, как Portland Trail Blazers потерпели поражение в первом раунде выступая в плей-офф Западной конференции, Нил Олши подробно рассказал о сезоне, составе и долгосрочной траектории команды.

    Ольши, президент баскетбольной команды Blazers, ответил на вопросы журналистов на тренировочном объекте Blazers в Туалатине, где команда проводила ежегодные выездные интервью в конце сезона.

    Во время беседы, которая длилась почти 30 минут, Олши обратился к фанатам, которые хотели пересмотреть состав, обсудил работу тренера Терри Стоттса, пообещал не «реагировать слишком остро» и многое, многое другое.

    Вот стенограмма интервью:

    Изменила ли зачистка первого раунда ваше мнение об этой команде и сезоне?

    «В сезоне это ничего не меняет.Я думаю, мы должны до некоторой степени разделить эти две вещи. В плей-офф мы проиграли четыре игры, и это не повлияло на чьи-либо общие взгляды на макроуровне. Я думаю, что плей-офф вызвал несколько проблем с командами, которые могут пойти на малый. Я думаю (есть) некоторые вещи, которые нам нужно решить. Но серии плей-офф всегда будут иллюстрировать недостатки. Вот что делают тренеры. Они могут сыграть с вами четыре раза. Они находят ваши слабости. И мы займемся этим в межсезонье.

    «Независимо от того, проиграли ли мы со счетом 4: 3, мы выйдем во второй раунд, ничто не останется незамеченным в организации. Это просто вопрос, я думаю, этот был настолько экстремальным, я не понимаю. Я не хочу слишком остро реагировать на один неблагоприятный матч и команду, которая только что сыграла выдающийся баскетбол. Вы просто не можете этого сделать. Вы не можете реагировать на это, ну, теперь мы должны остро реагировать на то, когда мы играем в этот стиль баскетбола. Мы собираемся сделать все, что в наших силах, чтобы обновить состав, как мы всегда делаем.Но мы также не собираемся упускать из виду успех, который мы имели в течение сезона, и рост, который у нас был ».

    Вы говорите неблагоприятный матч, вы имеете в виду Энтони Дэвиса или что-то еще?

    «Я имею в виду команду».

    Насколько вы были ошеломлены тем, как все разворачивается?

    «Я думаю, что все мы, на самом деле. Я думаю, это была повторяющаяся тема в выходных интервью. На сегодня ни у кого не запланировано полетов самолетов, потому что никто этого не ожидал.Но это случилось. У нас был шанс в игре 1. У нас были шансы в игре 2. Ясно, что игра 3 была большой неудачей, а затем прошлой ночью то же самое. Я действительно гордился тем, как ребята вернулись на выезд в четвертой четверти, несколько раз доведя игру до одного владения мячом. Я думаю ошеломлен; Думаю разочарован. Но я думаю, вы также должны сохранять перспективу. Мы были тремя семенами. Мы были на игру впереди Нового Орлеана. Мы расстаемся с ними по ходу сезона. В тот раз, когда мы обыграли их так, как было задумано, когда они играли мелко с (Никола) Миротичем в четыре и Энтони в пять, я думаю, что мы выиграли с преимуществом на один, у (Дамиана Лилларда) было 40, а у него было 20 в четвертой четверти.Так что потребовались гигантские усилия, чтобы получить его. Мы были гораздо более консервативны в наших ожиданиях от этой серии, чем, я думаю, эксперты, которые выбрали нас, чтобы выиграть ее. Потому что я думаю, мы знали, насколько они хороши и насколько они уникальны, играя Энтони в пять ».

    Как вы оцениваете этот год? Успех в ваших глазах?

    « Я не знаю. В глазах ваших парней это успех? »

    (Вопрос: Лично я считаю, что то, как все закончилось, многое от него уходит.)

    «Хорошо. И это справедливо. И я думаю, вы должны взглянуть на это с трех сторон. Вы должны посмотреть на регулярный чемпионат, где мы добились большого успеха. был посеян за два десятилетия. Я думаю, что постсезон не мог быть хуже. Я не знаю, что у вас может быть даже золотая середина. Я не думаю, что вы можете рассматривать это как одну последовательную тему. Я думаю, что вы действительно надо смотреть на них по отдельности Я думаю, есть много положительных моментов, которые нам нужно извлечь из регулярного чемпионата.Кроме того, есть много проблем, которые нам нужно решить, исходя из результатов очень сокращенного постсезона. Но я даже не знаю, что этот постсезон, честно говоря, был достаточно длинным, чтобы смешать его с остальными 82 играми. «

    Запад настолько силен. Насколько сложно сделать следующий шаг?

    » Спросите парней, которые заканчивают с четвертого по 15. Верно? Думаю, в прошлом году мы сидели в этой комнате, а в прошлом году пробились в плей-офф. И вопросительный знак был в том, сможем ли мы когда-нибудь стать командой, которая проведет серию плей-офф.Сможем ли мы получить преимущество на домашней площадке, войдя в четверку лучших? Как вы это делаете? Мы сделали это за счет внутреннего роста, отличного наставничества. Мы сделали это в команде. Мы сделали это с парнями, которые хорошо играют вместе, играют по системе. Мы сделали это с парнями, которые внесли свой вклад в разных областях. В течение года ребят просили подойти. А также временами отступать. Вот как мы это сделали. И мы продолжим это делать. Мы строим команду.

    «Сегодня у меня нет ответов на все вопросы.Все хотят знать, что есть некий волшебный свободный агент. Есть невероятная сделка. Есть какой-нибудь драфт-выбор, который произведет революцию в вашей франшизе. И очень часто вы не знаете, откуда приходит помощь. Некоторые из них — это то, как вы меняете состав, кого-то, от кого вы не ожидаете выхода. Кто бы мог подумать, что Аль-Фарук Амину проведет большую часть сезона, забивая 40 процентов из трех? Но он это сделал. Верно? Возвращение Мо Харклесса в основной состав. Мы идем 17-3 с Мо в стартовом составе.(Юсуф Нуркич) начал медленно. Хорошо сыграли. На это нужно время. Мы проиграли прошлой ночью. Этого никто не ожидал. Этого никто не ожидал. Это произошло. И теперь у нас есть 10 недель на то, чтобы как бы обратиться и создать команду, которая перейдет в свободное агентство, лето и торги. Мы будем делать то, что делаем всегда. Мы будем набирать, торговать, развивать игроков, свободное агентство, и мы создадим состав ».

    Есть фанаты, которые призывают к радикальным изменениям. Как вы думаете, список нуждается в доработке или значительных изменениях?

    То же люди, которые хотели радикальных изменений в прошлом году?

    (Вопрос: Я не знаю.Я их лично не знаю. Я просто слышу от них все время)

    «Хорошо. Отлично. Что ж, в прошлом году должны были произойти радикальные изменения, потому что мы были охвачены Golden State в первом раунде, и все паникеры слишком остро отреагировали. Golden State продолжил зачистку. Юта и Сан-Антонио обыграли Сан-Антонио и в основном выиграли из пяти, не беспокоясь о Кливленде. И все остро отреагировали.

    «Так что давайте будем немного взвешенными в нашей реакции на тот факт, что мы закончили тяжелый матч с двумя лучшими — Кстати игрок НБА, имеющий карьерную серию.Джру (Холидей) здоров и играл в феноменальный баскетбол. Такое случается.

    «Но эта идея о том, что (нам нужны) радикальные изменения. Где были все эти люди, которые хотели радикальных изменений 10 дней назад? Где они были? Именно они отскакивали от стен в Moda Center, когда мы получили третье семя для впервые с 1999-00. Так что наша работа — быть измеримыми и не реагировать слишком остро. Потому что, когда вы остро реагируете, когда вы делаете ошибки. Никто не думает, что этот список является законченным продуктом. Все понимают, что это незавершенная работа.Но работа еще не закончена. Относительно людей в декабре, которые жаловались, что мы не собираемся выходить в плей-офф, и что мы были в чистилище, потому что не собирались выходить в плей-офф и не собирались выбирать достаточно высоко. Верно? Это был боевой клич. Потом было: «Боже мой. Они собираются сорвать третье семя, потому что проиграют все эти игры. Они даже не получат преимущества на домашнем корте ». Они остро отреагировали на это. Знаешь что? Если серия идет шесть или семь, если первая игра пойдет по-другому, когда мы проиграли один, кто знает, куда пойдет эта серия? Но этого не произошло.

    «Но, опять же, вы не берете четыре игры, слишком остро реагируете и преуменьшаете то, чего вы достигли за 82 игры. Основа закладывается в течение регулярного сезона. В серии плей-офф всегда есть посторонние факторы. Мы вышли первые, так что это будет усилено, и этой серии будет уделяться чрезмерное внимание, пока не начнут выходить другие команды. И тогда им всем потребуются радикальные изменения ».

    Устанавливает ли то, как вы закончили регулярный сезон, новую планку для команды и будущих ожиданий?

    «Планка всегда одна и та же.Вы пытаетесь быть фактором в плей-офф, вы пытаетесь быть командой, которая может выйти в плей-офф и посмотреть, что произойдет. И вы пытаетесь поставить на поле самую лучшую команду. И вы пытаетесь делать это в процессе роста, а не просто ищете помощи извне. Но растет изнутри. Я думал, что это был самый конкурентоспособный состав за те три года, когда мы как бы перестраивались. Я думал, что Дамиан показал отличное лидерство в течение года. Я думаю, что в этом сезоне у нас, вероятно, было больше приливов и отливов, чем в первые два года.Первые два года мы только начинали очень медленно и опаздывали. И это были почти два разных сезона. Этот был то вверх, то вниз. В течение года нам пришлось столкнуться с множеством невзгод. Я думаю, что иногда люди становятся слишком высокими, но они также опускаются слишком низко. Когда все будет сказано и сделано, через несколько недель мы оглянемся назад и поймем, что проиграли в первом раунде. И будь то 4: 3 или 4: 0, это не изменит того факта, что в регулярном сезоне многие команды, которые сейчас играют в плей-офф, мы либо сметали, либо разделяли, либо побеждали.И мы поймем, насколько мы были конкурентоспособными ».

    Значит, вы доверяете команде, которую видели в регулярном сезоне, больше, чем команде, которую мы только что видели, захваченной? игр, чем команда, которую я видел за четыре игры ».

    Можете ли вы обратиться к наставнику Терри Стоттсу и его команде в этом году?

    « Чего вы ожидаете от тренерского штаба? Ваши игроки поправляются. Это был внутренний рост. Вы соревнуетесь каждую ночь? Удалось ли вам улучшить те области, в которых вы боролись в прошлом? Когда мы сидели в этой комнате год назад, люди говорили о том, что все жаловались на нашу защиту.Это было 26-е место в лиге. Он занял восьмое место (в этом году). Верно? Это рост. Молодым командам требуется больше времени, чтобы развить оборонительный настрой. Молодым командам сложнее хорошо защищаться. Обычно ветеранские команды — это оборонительные команды. Что касается нападения, я думаю, что в этом году мы на самом деле немного отступили, потому что упор был сделан на обороне. Подборы в обороне помогали нам в некоторых из первых частей сезона, когда наступление было тяжелым. Терри может поговорить об этом подробнее.Но никогда не возникает вопроса о тренерской работе или … были ли мы готовы к игре или нет. Это было оговорено. Как я уже сказал, мы столкнулись с хорошо наставленной командой с суперзвездой, играющей в обе стороны, которая играла в уникальном стиле, по сравнению с тем, как они играли первые три раза, когда мы играли с ними в регулярном сезоне. Они сыграли очень хорошо. И я думаю, что единственное, в чем они проделали феноменальную работу, было то, что они навязали нам свой стиль игры. И в результате вышли победителями.«

    В свете финансовых ограничений, которые у вас возникли этим летом, какие автомобили вы считаете наиболее подходящими для состава?

    « Это всегда одно и то же. Это драфт, торговля, развитие игроков, свободное агентство. Люди попадают в ловушку финансовых ограничений. Во-первых, половина лиги достигла или будет … (выше) потолка зарплат в следующем году. И это результат резкого скачка кэпов два года назад, увеличения расходов. Так оно и есть. Но есть миллион способов создать команду, и я думаю, что все увлекаются мыслью, что есть какое-то волшебное решение, потому что у вас есть место для капиталовложений или у вас есть исключение.Это не обязательно правда. Если вы посмотрите, сколько команд стали лучше в этом году из-за перестановок или действий, связанных с драфтом, по сравнению с командами, у которых свободный агент появился в их верхней комнате, команды, которые сделали первое, улучшили больше, чем команды, только что подписавшие свободного агента . Вот как это работает. Итак, как я уже сказал, ребята будут продолжать поправляться. В составе по-прежнему есть много плюсов. У нас есть свой выбор на драфте в первом раунде, мы будем активны на драфте, как обычно. Мы были активными и авантюрными в сделках.Мы нашли ценных игроков. Мы продолжим это делать.

    Одна из вещей, которые меня разочаровали с точки зрения повествования за весь этот год, которую никто не заметил, заключалась в следующем: насколько важно качество ваших игроков и построение команды для победы и поражения в баскетбольных матчах. Каждый хочет посмотреть на пустоту на конкретных игроков. Этот игрок, этот игрок, этот игрок. Его числа, его числа, его числа. И на что никто не обращал внимания, так это на химию, дух товарищества, командную работу, то, как эта группа держалась вместе.Мы проиграли бы по три-четыре подряд, они ни разу не сломались. Это расстраивало парней из СМИ, потому что вы спрашивали Dame или CJ (Макколлума), они говорили: «У нас все в порядке. У нас все в порядке.’ И никто не хотел верить, что у нас все хорошо. Тем не менее, каким-то образом мы одержали 49 побед и стали третьими посевами на Западной конференции. Мы были в порядке. Они этому поверили. Они должны верить, и они верят друг в друга, и они возвышают друг друга. Это одна из вещей, о которой мы говорили с руководством Dame.Великая способность Dame с точки зрения лидерства заключается в том, чтобы побудить парней поднять свою игру до уровня, на котором они могут играть. Повышая уровень игры каждого на пять, 10, 15 процентов, благодаря полномочиям, которые он им дает, в совокупности добавляет еще одного игрока, еще одного влиятельного игрока. Я думаю, что временами это труднее всего; это не NBA2K. Команды с самыми известными именами в своих командах не обязательно являются лучшими командами. И все сводится к коучингу, культуре, организации, сплочению коллектива и характеру.И это то, что вы видели во время приливов и отливов нашего года. Здесь никогда не ломалось. Ни разу. Вы никогда не слышали ни одной истории о его разрушении, отношениях между игроками, игроками и тренерами, организацией, организацией и тренером. Никогда. Ни разу. Вы никогда этого не слышали. И это то, что удерживало всех вместе. И эта связь — вот почему, даже проигрыш в четыре раза, даст нам что-то, на что можно опираться, а не о чем сожалеть.

    Вы разговаривали с владельцем Полом Алленом после окончания сезона? И что он сказал?

    » Да, вчера вечером я был с Полом.Он сказал, что у нас был отличный регулярный сезон, он гордился тем, как мы играем. Он гордился тем фактом, что даже вчера вечером, когда у нас осталось 15, мы не прекращали сражаться. Но, судя по регулярному чемпионату, у нас были большие надежды, чем на выход в плей-офф в первом раунде. И нам нужно найти способ поправиться ».

    Как вы подойдете к бесплатному агентству Нуркича?

    « Мы не можем. Вы знаете, что мы не можем обсуждать свободу воли. Он ограниченно свободный агент. Мы справимся с этим, когда начнется свободное агентство.Он не единственный ограниченно свободный агент в списке. Пэт (Коннотон) ограничен, Шабаз (Нэпир) ограничен. Эд (Дэвис) неограничен. Итак, у нас есть парни, с которыми нам нужно иметь дело внутри компании. И мы с этим справимся. Прямо сейчас мы пытаемся пройти наши выездные интервью с нашими парнями и проверить их, убедиться, что у них есть то, что им нужно в межсезонье, и составить план для молодых парней настолько, насколько мы ожидаем от них в межсезонье, готовьте их к летней лиге.И через пару недель мы поедем в Чикаго и начнем работать над черновиком ».

    Вы разделяете любовь Портленда к Эду Дэвису?

    « Да. Все так делают. Я подписал его. Другой парень был счастлив, что покинул Лос-Анджелес и приехал в Портленд вместе со мной. Итак, поехали. «

    Вы остаетесь непоколебимы, что не собираетесь разрушать ядро ​​Лилларда и МакКоллума?

    » Да. Ага. Когда 27 других команд не завидуют нашей тыловой зоне, тогда я начну беспокоиться (об этом).Еще одна вещь, которую я сказал кому-то вчера вечером, они спрашивали: «Сможете ли вы победить с двумя охранниками ростом 6 футов 3 дюйма?» Нас только что накрыла команда, которая стартовала с тремя охранниками до 6-4. Так что я не знаю, какое отношение к этому имеют наши двое парней ».

    Вы так положительно оцениваете команду, которая только что вышла из плей-офф. Что вселяет в вас такой оптимизм в отношении этого состава и этого ядра?

    «Рост. Думаю, по сравнению с прошлым годом у нас было улучшение на восемь игр. Думаю, если вы спросите кого-нибудь, в этом году мы раздали несколько игр.Я даже не знаю, что запись на 100 процентов отражает то, на что она была способна. У нас действительно были приливы и отливы, и мы проиграли некоторые игры, которые, я думаю, если вы оглянетесь на расписание, вы бы отметили как победы. А потом мы также выиграли несколько игр, и я не думаю, что кто-то ожидал, что мы выиграем. Я думаю, когда вы смотрите на то, насколько мы конкурентоспособны с командами, которые участвовали в нашей конференции, которые были в нашем дивизионе, которые сейчас играют на действительно высоком уровне, и как мы выступали против них, зная внутренне объем работы, которую они Путин.И я думаю, что больше всего, самый большой вопрос, который у всех нас был, выходит за рамки того, есть ли у нас два охранника в нашей тыловой зоне при 6-3, станет ли Нурк игроком или что-то еще; Самым большим вопросом всегда был: «Может ли эта группа в том виде, в котором она построена, оказывать защитное воздействие?»

    «И я думаю, с точки зрения тренера, с точки зрения приверженности игроков, чтобы получить поддержку от парней, которые, честно говоря, помимо Фарука и, возможно, Мо (Харклесс), действительно парни, которые, вероятно, вошли в лигу как нападающие.Чтобы получить такую ​​поддержку от индивидуальной и командной концепции, вот почему мы так хорошо играли на выезде до этой серии, потому что защита двигалась. Думаю, тренеры поверили. Но я не знаю, верили ли мы, что с этой группой мы сможем войти в топ-10 защиты на весь сезон НБА. И мы сделали. И я думаю, что в ноябре / декабре были даже парни, которые смотрели на это, основанное на аналитике, и задавались вопросом, было ли оно устойчивым или это было побочным продуктом мягкого начала графика. И это было.Когда вы можете быть в десятке лучших в течение всего года при расписании из 82 игр с составом, преимущественно ориентированным на нападение, это свидетельство той работы, которую выполняли тренеры. И также заслуживает похвалы игрокам, что они смогли принять совершенно другой образ мышления, будучи парнями с двусторонним движением, вместо того, чтобы просто пытаться превзойти людей на другом конце площадки ». ребята сказали, что он был членом команды. Это единственное, чему вы научились?

    «Я отдаю должное Заку Уильямсу, который руководит нашей аналитикой.Потому что он, наверное, самый большой сторонник Мо. Всякий раз, когда что-то ухудшалось, все цифры продолжали показывать, насколько важен для нас Мо. В прошлом году, когда мы финишировали хорошо на протяжении всего года, мы были на высоте с Мо и Фаруком на трех и четырех позициях. Когда пришел Нурк, стало еще лучше. Думаю, мы видели это в этом году. По общему признанию, Мо начал медленно. И Нурк тоже. Рано мы были вялыми. У нас был мягкий график, которым мы особо не пользовались, и ребята играли не на своем уровне. А Терри вернул Мо в стартовый состав.Эван немного пострадал от напряжения икр, поэтому у него были ограниченные минуты. И мы пошли на 17: 3.

    «Итак, Мо — сильный парень для нас. Он дает нам большую универсальность в обороне. Он может забивать при переходе. Он делает много вещей на три / четыре, переключаемых с Фаруком. Он может защищать один проход — четыре. И он, вероятно, лучший спортсмен в команде. Он есть. Он является стержнем многих вещей, которые мы делаем, и я думаю, что многие ребята, которые знают, когда Мо упал в конце года, были ребята, которые знали, что это будет огромная потеря для нас.Я не использую травму как оправдание. Это просто ответ на ваш вопрос о том, насколько важно Мо играть на том уровне, на который он способен. Вы забываете, что мы потеряли одного из наших лучших защитников, (но) Мо также был вторым в НБА по проценту трехочковых бросков с игры после крайнего срока обмена после Дуга Макдермотта. Он набирал 54,5 процента. В сезоне он увеличился со стрельбы с 31 до 41,5. Думаю, Мо в итоге стал лидером нашей команды по трехочковой стрельбе в регулярном чемпионате. Это большое дело. Все ищут трехмерных парней.Ну вот и все. А ему всего 24 года. Я думаю, в следующем году мы увидим более последовательного Мо, понимающего, что ему нужно прийти в День 1 и играть на том уровне, на который он способен ».

    Как бы вы оценили рост и важность Зака ​​Коллинза в будущем?

    «Я думаю, что Зак сыграл для нас очень хорошо. Я думаю, он сделал то, что его просили. Он оказал влияние в обороне. Мы закончили регулярку №1 в защите оправы. Многие из них были Нурком и Эд. Но многое из этого было и у Зака ​​в четыре года.Его длина, его способность новичка учиться и завоевывать репутацию у судей, что он знал, как играть вертикально, не собирая фолов, что он делал в начале года в летней лиге. Я также считаю, что он много чего сделал для нас как команды с точки зрения баланса пола, потому что он делил площадку с Эдом, это был один из наших самых продуктивных составов. Но он играл далеко от корзины. Он дошел до трехочковой, наверное, раньше, чем нам хотелось бы. Не знаю, был ли он к этому готов.Но это открыло корт, пусть Эд будет нырять, пусть Эд будет атаковать подбирая. И я думаю, что самое главное, что он сделал, будучи 10-м пиком на драфте, он должен был заработать свои полосы. День 1 ему не вручили. Он присоединился к команде плей-офф, вернувшейся команде плей-офф, команде с устремлениями в плей-офф, и у других парней были возможности перед ним на этой позиции. Калеб (Суаниган) получил выстрел. Ной (Вонлех) получил выстрел. Фарук был стартером. Поэтому, когда он вышел на сцену, он заслужил это при поддержке, одобрении и уважении ветеранов в раздевалке.И это более серьезное препятствие для преодоления этих игровых минут. Кто угодно может получить минуты в НБА. Одна из вещей, которая ускорит рост Зака ​​… он не только заработал это, но и получил свои минуты, играя в команде, играющей для чего-то другого, а не только для получения минут для новичков. И я думаю, что это дает ему основу для дальнейшего развития ».

    Джо Фриман | [email protected] | 503-294-5183 | @BlazerFreeman

    Обнаружение и проверка экспрессии TNF в слизистой оболочке в сочетании с гистологической оценкой — биомаркер для персонализированного лечение язвенного колита | BMC Gastroenterology

  • 1.

    Zhang YZ, Li YY. Воспалительные заболевания кишечника: патогенез. Мир Дж. Гастроэнтерол. 2014; 20: 91–9.

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google Scholar

  • 2.

    Хенриксен М., Янсен Дж., Лигрен И. и др. Язвенный колит и клиническое течение: результаты 5-летнего популяционного исследования (исследование IBSEN). Воспаление кишечника. 2006; 12: 543–50.

    PubMed Статья Google Scholar

  • 3.

    Solberg IC, Hoivik ML, Cvancarova M, et al. Модель матрицы рисков для прогнозирования колэктомии в популяционном исследовании пациентов с язвенным колитом (исследование IBSEN). Сканд Дж Гастроэнтерол. 2015; 50: 1456–62.

    PubMed Статья Google Scholar

  • 4.

    Williet N, Sandborn WJ, Peyrin Biroulet L. Исходы, сообщаемые пациентами, в качестве основных конечных точек в клинических испытаниях воспалительного заболевания кишечника. Клин Гастроэнтерол Гепатол.2014; 12: 1246–1256.e6.

    PubMed Статья Google Scholar

  • 5.

    da Silva BC, Lyra AC, Rocha R, et al. Эпидемиология, демографические характеристики и прогностические предикторы язвенного колита. Мир Дж. Гастроэнтерол. 2014; 20: 9458–67.

    PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 6.

    Сильверберг М.С., Сатсанги Дж., Ахмад Т. и др. На пути к комплексной клинической, молекулярной и серологической классификации воспалительных заболеваний кишечника: отчет рабочей группы Всемирного гастроэнтерологического конгресса в Монреале 2005 г.Можно J Гастроэнтерол. 2005; 19 Дополнение A: 5A – 36A.

    PubMed Статья Google Scholar

  • 7.

    Сатсанги Дж., Сильверберг М.С., Вермейр С. и др. Монреальская классификация воспалительных заболеваний кишечника: разногласия, консенсус и последствия. Кишечник. 2006; 55: 749–53.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 8.

    Дассопулос Т., Коэн Р.Д., Шерл Э.Дж. и др.Пути лечения язвенного колита. Гастроэнтерология. 2015; 149: 238–45.

    PubMed Статья Google Scholar

  • 9.

    Магро Ф, Джиончетти П., Элиаким Р. и др. Третий европейский консенсус по диагностике и лечению язвенного колита, основанный на фактических данных. Часть 1: определения, диагностика, внекишечные проявления, беременность, наблюдение за раком, хирургия и заболевания подвздошно-анального мешка. Колит Дж. Крона. 2017; 11: 649–70.

    PubMed Статья Google Scholar

  • 10.

    Danese S, Siegel CA, Peyrin-Biroulet L. Обзорная статья: интеграция будесонида-MMX в алгоритмы лечения язвенного колита легкой и средней степени тяжести. Алимент Pharmacol Ther. 2014; 39: 1095–103.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 11.

    D’Haens GR. Нисходящая терапия для ВЗК: обоснование и необходимые доказательства. Нат Рев Гастроэнтерол Гепатол. 2010; 7: 86–92.

    PubMed Статья Google Scholar

  • 12.

    Вольф А.С., Хаммонд М.Э., Хикс Д.Г. и др. Рекомендации по тестированию рецептора 2 эпидермального фактора роста при раке груди: Американское общество клинической онкологии / Колледж американских патологов, обновленное руководство по клинической практике. J Clin Oncol. 2013; 31: 3997–4013.

    PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 13.

    Choung RS, Princen F, Stockfisch TP, et al. Серологические маркеры, связанные с микробами, могут предсказать поведение при болезни Крона за годы до постановки диагноза.Алимент Pharmacol Ther. 2016; 43: 1300–10.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 14.

    Гамильтон А.Л., Камм М.А., Де Круз П. и др. Серологические антитела в отношении исхода послеоперационной болезни Крона. J Gastroenterol Hepatol. 2017; 32: 1195–203.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 15.

    Spekhorst LM, Imhann F, Festen EAM, et al.Профиль когорты: дизайн и первые результаты голландского биобанка IBD: перспективного общенационального биобанка пациентов с воспалительным заболеванием кишечника. BMJ Open. 2017; 7: e016695.

    PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 16.

    Стивенс Т.В., Матеувсен М., Лоннквист М.Х. и др. Систематический обзор: прогностические биомаркеры терапевтического ответа при воспалительных заболеваниях кишечника — персонализированная медицина в зачаточном состоянии. Алимент Pharmacol Ther.2018; 48: 1213–31.

    PubMed Статья Google Scholar

  • 17.

    Портер С.К., Риддл М.С., Гутьеррес Р.Л. и др. Когортный профиль исследования PRoteomic и открытия в когорте трехкомпонентного исследования ВЗК (PREDICTS): обоснование, организация, дизайн и исходные характеристики. Contemp Clin Trials Commun. 2019; 14: 100345.

    PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 18.

    Дулай П.С., Пейрин-Бируле Л., Данезе С. и др. Подходы к интеграции биомаркеров в клинические испытания и пути оказания помощи в качестве мишеней для лечения воспалительных заболеваний кишечника. Гастроэнтерология. 2019; 157: 1032–1043.e1.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 19.

    Olsen T, Goll R, Cui G, et al. Экспрессия гена TNF-альфа в слизистой оболочке толстой кишки как предиктор ремиссии после индукционной терапии инфликсимабом при язвенном колите.Цитокин. 2009. 46: 222–7.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 20.

    Ризмо Р., Олсен Т., Цуй Дж. И др. Нормализация уровней экспрессии генов цитокинов слизистой оболочки предсказывает длительную ремиссию после прекращения терапии анти-TNF при болезни Крона. Сканд Дж Гастроэнтерол. 2013; 48: 311–9.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 21.

    Йонсен К.М., Голл Р., Хансен В. и др.Повторная усиленная индукция инфликсимаба — результат 11-летнего проспективного исследования язвенного колита с использованием нового алгоритма лечения. Eur J Gastroenterol Hepatol. 2017; 29: 98–104.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 22.

    Flamant M, Roblin X. Воспалительное заболевание кишечника: к персонализированной медицине. Терапия Адв Гастроэнтерол. 2018; 11: 1756283×17745029.

    PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 23.

    Siegel CA, Refocusing IBD. Ведение пациентов: индивидуальный, проактивный и ориентированный на пациента уход. Am J Gastroenterol. 2018; 113: 1440–3.

    PubMed Статья Google Scholar

  • 24.

    Веймерс П., Мункхольм П. Естественная история ВЗК: извлеченные уроки. Варианты лечения Curr Gastroenterol. 2018; 16: 101–11.

    PubMed Статья Google Scholar

  • 25.

    de Souza HSP.Этиопатогенез воспалительного заболевания кишечника: сегодня и завтра. Курр Опин Гастроэнтерол. 2017; 33: 222–9.

    PubMed Статья Google Scholar

  • 26.

    Ким Д.Х., Чхон Дж. Х. Патогенез воспалительного заболевания кишечника и последние достижения в области биологической терапии. Immune Netw. 2017; 17: 25–40.

    PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 27.

    Мосли М.Х., Фиган Б.Г., Цзоу Г. и др.Разработка и проверка гистологического индекса ЯК. Кишечник. 2017; 66: 50–8.

    PubMed Статья Google Scholar

  • 28.

    Дигнасс А., Линдси Дж. О., Штурм А. и др. Второй европейский консенсус, основанный на фактических данных, по диагностике и лечению язвенного колита. Часть 2: текущее лечение. Колит Дж. Крона. 2012; 6: 991–1030.

    PubMed Статья Google Scholar

  • 29.

    Фиган Б.Г., Гринберг Г.Р., Уайлд Джи и др. Лечение язвенного колита гуманизированным антителом к ​​интегрину α4β7. N Engl J Med. 2005; 352: 2499–507.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 30.

    Olsen T, Goll R, Cui G, et al. Уровни фактора некроза опухоли альфа в тканях коррелируют со степенью воспаления при невылеченном язвенном колите. Сканд Дж Гастроэнтерол. 2007; 42: 1312–20.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 31.

    Cui G, Olsen T, Christiansen I, et al. Улучшение полимеразной цепной реакции в реальном времени для количественной оценки экспрессии мРНК TNF-alpha в воспаленной слизистой оболочке толстой кишки: подход к оптимизации процедур для клинического использования. Сканд Дж. Клин Лаб Инвест. 2006; 66: 249–59.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 32.

    Olsen T, Rismo R, Gundersen MD, et al. Нормализация фактора некроза опухоли-альфа слизистой оболочки: новый критерий прекращения терапии инфликсимабом при язвенном колите.Цитокин. 2016; 79: 90–5.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 33.

    Диаб Дж., Аль-Махди Р., Гувейя-Фигейра С. и др. Количественный анализ оксилипинов и эндоканнабиноидов слизистой оболочки толстой кишки у пациентов с язвенным колитом, не получавших лечения, и пациентов с глубокой ремиссией и потенциальной связи с экспрессией генов цитокинов. Воспаление кишечника. 2019; 25: 490–7.

    PubMed Статья Google Scholar

  • 34.

    Youden WJ. Индекс рейтинговых диагностических тестов. Рак. 1950; 3: 32–5.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 35.

    Glas AS, Lijmer JG, Prins MH, et al. Отношение шансов диагностики: единственный показатель эффективности теста. J Clin Epidemiol. 2003. 56: 1129–35.

    PubMed Статья Google Scholar

  • 36.

    D’Haens G, Baert F, van Assche G, et al.Ранняя комбинированная иммуносупрессия или традиционное лечение у пациентов с впервые диагностированной болезнью Крона: открытое рандомизированное исследование. Ланцет. 2008; 371: 660–7.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 37.

    Colombel JF, Rutgeerts P, Reinisch W. et al. Раннее заживление слизистой оболочки с помощью инфликсимаба связано с улучшением отдаленных клинических результатов при язвенном колите. Гастроэнтерология. 2011; 141: 1194–201.

    CAS PubMed Статья Google Scholar

  • 38.

    Burisch J, Kiudelis G, Kupcinskas L; Группа Epi-IBD и соавт. Естественное течение болезни Крона в течение первых 5 лет после постановки диагноза в начальной когорте европейской популяции: исследование Epi-IBD. Кишечник. 2019; 68: 423–33.

  • 39.

    Rutgeerts P, Vermeire S, Van Assche G. Заживление слизистой оболочки при воспалительном заболевании кишечника: невозможный идеал или терапевтическая цель? Кишечник. 2007; 56: 453–5.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 40.

    Arias MT, Vande Casteele N, Vermeire S и др. Панель для прогнозирования отдаленных результатов терапии инфликсимабом у пациентов с язвенным колитом. Клин Гастроэнтерол Гепатол. 2015; 13: 531–8.

    PubMed Статья Google Scholar

  • 41.

    Schniers A, Anderssen E, Fenton CG, et al. Протеом язвенного колита в биоптатах толстой кишки взрослых — оптимизированная подготовка образцов и сравнение со здоровыми контролями. Proteomics Clin Appl.2017; 11. https://doi.org/10.1002/prca.201700053. https://onlinelibrary.wiley.com/action/showCitFormats?doi=10.1002%2Fprca.201700053.

  • 42.

    Taman H, Fenton CG, Hensel IV, et al. Полногеномное метилирование ДНК при язвенном колите, не получавшем лечения. Колит Дж. Крона. 2018; 12: 1338–47.

    PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 43.

    Taman H, Fenton CG, Hensel IV, et al. Транскриптомный ландшафт язвенного колита, не получавшего лечения.Колит Дж. Крона. 2018; 12: 327–36.

    PubMed Статья Google Scholar

  • 44.

    Schniers A, Goll R, Pasing Y, et al. Язвенный колит: функциональный анализ углубленного протеома. Clin Proteomics. 2019; 16: 4.

    PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 45.

    Диаб Дж., Хансен Т., Голл Р. и др. Липидомия при язвенном колите выявляет изменение липидного состава слизистых оболочек, связанное с болезненным состоянием.Воспаление кишечника. 2019; 25: 1780–7.

    PubMed Статья Google Scholar

  • Химическая модификация терапевтических средств PS-ASO снижает связывание клеточных белков и улучшает терапевтический индекс

  • 1.

    Crooke, S.T. Молекулярные механизмы антисмысловых олигонуклеотидов. Nucleic Acid Ther. 27 , 70–77 (2017).

    CAS Статья Google Scholar

  • 2.

    Хворова, А. и Уоттс, Дж. К. Химическая эволюция олигонуклеотидной терапии, имеющей клиническое применение. Nat. Biotechnol. 35 , 238–248 (2017).

    CAS Статья Google Scholar

  • 3.

    Суэйзи, Э. и Бхат, Б. в Технология антисмысловых лекарственных средств — принципы, стратегии и приложения 2-е изд. (Изд. Крук, С. Т.) 143–182 (CRC Press, 2008).

  • 4.

    Фрейзер, К.S. Антисмысловые олигонуклеотидные терапии: перспективы и проблемы с точки зрения токсикологического патолога. Toxicol. Патол. 43 , 78–89 (2015).

    Артикул Google Scholar

  • 5.

    Swayze, E. E. et al. Антисмысловые олигонуклеотиды, содержащие заблокированную нуклеиновую кислоту, улучшают эффективность, но вызывают значительную гепатотоксичность у животных. Nucleic Acids Res. 35 , 687–700 (2007).

    CAS Статья Google Scholar

  • 6.

    Burdick, A. D. et al. Мотивы последовательности, связанные с гепатотоксичностью заблокированной нуклеиновой кислоты — модифицированные антисмысловые олигонуклеотиды. Nucleic Acids Res. 42 , 4882–4891 (2014).

    CAS Статья Google Scholar

  • 7.

    Kakiuchi-Kiyota, S. et al. Сравнение профилей транскрипции в печени заблокированных антисмысловых олигонуклеотидов к рибонуклеиновой кислоте: доказательство различных путей, вносящих вклад в неопосредованную мишенью токсичность у мышей. Toxicol. Sci. 138 , 234–248 (2014).

    CAS Статья Google Scholar

  • 8.

    Kamola, P.J. et al. In silico и in vitro оценка экзонных и интронных нецелевых эффектов является критическим элементом оптимизации терапевтического гэпмера ASO. Nucleic Acids Res. 43 , 8638–8650 (2015).

    CAS Статья Google Scholar

  • 9.

    Kasuya, T. et al. Рибонуклеаза h2-зависимая гепатотоксичность, вызванная заблокированными нуклеиновыми кислотами, модифицированными гэпмерными антисмысловыми олигонуклеотидами. Sci. Отчетность 6 , 30377 (2016).

    CAS Статья Google Scholar

  • 10.

    Burel, S.A. et al. Гепатотоксичность высокоаффинных гэпмерных антисмысловых олигонуклеотидов опосредуется зависимым от РНКазы h2 беспорядочным сокращением очень длинных транскриптов пре-мРНК. Nucleic Acids Res. 44 , 2093–2109 (2016).

    CAS Статья Google Scholar

  • 11.

    Kakiuchi-Kiyota, S., Whiteley, L.O., Ryan, A.M. & Mathialagan, N. Разработка метода профилирования белковых взаимодействий с LNA-модифицированными антисмысловыми олигонуклеотидами с использованием белковых микрочипов. Nucleic Acid Ther. 26 , 93–101 (2016).

    CAS Статья Google Scholar

  • 12.

    Kamola, P.J. et al. Стратегии скрининга in vivo и снижения гепатотоксичности, связанной с антисмысловыми препаратами. Мол. Ther. Нуклеиновые кислоты 8 , 383–394 (2017).

    CAS Статья Google Scholar

  • 13.

    Dieckmann, A. et al. Чувствительный подход in vitro для оценки токсического потенциала высокоаффинных гэпмерных олигонуклеотидов, зависящего от гибридизации. Мол. Ther. Нуклеиновые кислоты 10 , 45–54 (2018).

    CAS Статья Google Scholar

  • 14.

    Bohr, H.G. et al. Электронные структуры фосфоротиоатных олигонуклеотидов LNA. Мол. Ther. Нуклеиновые кислоты 8 , 428–441 (2017).

    CAS Статья Google Scholar

  • 15.

    Brown, D. A. et al. Влияние фосфоротиоатной модификации олигодезоксинуклеотидов на специфическое связывание с белками. J. Biol. Chem. 269 , 26801–26805 (1994).

    CAS PubMed Google Scholar

  • 16.

    Лян, Х., Сан, Х., Шен, В. и Крук, С. Т. Идентификация и характеристика внутриклеточных белков, которые связывают олигонуклеотиды с фосфоротиоатными связями. Nucleic Acids Res. 43 , 2927–2945 (2015).

    CAS Статья Google Scholar

  • 17.

    Shen, W. et al. Острая гепатотоксичность 2’-фтор-модифицированных 5-10-5 гэпмер-фосфоротиоатных олигонуклеотидов у мышей коррелирует с внутриклеточным связыванием белков и потерей белков DBHS. Nucleic Acids Res. 46 , 2204–2217 (2018).

    CAS Статья Google Scholar

  • 18.

    Викерс, Т. А. и Крук, С. Т. Разработка количественного анализа сродства BRET для взаимодействий нуклеиновых кислот с белками. PLoS ONE 11 , e0161930 (2016).

    Артикул Google Scholar

  • 19.

    Sewing, S. et al. Организация прогностического анализа in vitro для оценки гепатотоксического потенциала олигонуклеотидных препаратов. PLoS ONE 11 , e0159431 (2016).

    Артикул Google Scholar

  • 20.

    Шен, В., Лян, Х. и Крук, С.T. Фосфоротиоатные олигонуклеотиды могут замещать РНК NEAT1 и образовывать ядерные параспеклевидные структуры. Nucleic Acids Res. 42 , 8648–8662 (2014).

    CAS Статья Google Scholar

  • 21.

    Бейли, Дж. К., Шен, В., Лян, X. Х. и Крук, С. Т. Белки, связывающие нуклеиновые кислоты, влияют на внутриклеточное распределение фосфоротиоатных антисмысловых олигонуклеотидов. Nucleic Acids Res. 45 , 10649–10671 (2017).

    CAS Статья Google Scholar

  • 22.

    Lorenz, P., Baker, B.F., Bennett, C.F. и Spector, D. L. Фосфоротиоатные антисмысловые олигонуклеотиды индуцируют образование ядерных телец. Мол. Биол. Клетка. 9 , 1007–1023 (1998).

    CAS Статья Google Scholar

  • 23.

    Calo, E. et al. Ткани-селективные эффекты ядрышкового стресса и повреждения рДНК при нарушениях развития. Nature 554 , 112–117 (2018).

    CAS Статья Google Scholar

  • 24.

    Vickers, T. A. & Crooke, S. T. Скорости основных стадий молекулярного механизма РНКазы h2-зависимого антисмыслового олигонуклеотида, индуцированного деградацией РНК. Nucleic Acids Res. 43 , 8955–8963 (2015).

    CAS Статья Google Scholar

  • 25.

    Liang, X. H., Sun, H., Nichols, J. G. & Crooke, S. T. РНКаза h2-зависимые антисмысловые олигонуклеотиды обладают высокой активностью в управлении расщеплением РНК как в цитоплазме, так и в ядре. Мол. Ther. 25 , 2075–2092 (2017).

    CAS Статья Google Scholar

  • 26.

    Crooke, S.T., Wang, S., Vickers, T.A., Shen, W. & Liang, X.H. Поглощение клетками и передача антисмысловых олигонуклеотидов. Nat. Biotechnol. 35 , 230–237 (2017).

    CAS Статья Google Scholar

  • 27.

    Thomas, M. P. et al. Апоптоз запускает специфический, быстрый и глобальный распад мРНК с 3’-уридилированными промежуточными продуктами, деградируемыми DIS3L2. Cell Rep. 11 , 1079–1089 (2015).

    CAS Статья Google Scholar

  • 28.

    Лян, Х.H. et al. Белок Hsp90 взаимодействует с фосфоротиоатными олигонуклеотидами, содержащими гидрофобные 2’-модификации, и усиливает антисмысловую активность. Nucleic Acids Res. 44 , 3892–3907 (2016).

    CAS Статья Google Scholar

  • 29.

    Mircsof, D. et al. Мутации в NONO приводят к синдромальной умственной отсталости и тормозным синаптическим дефектам. Nat. Neurosci. 18 , 1731–1736 (2015).

    CAS Статья Google Scholar

  • 30.

    Шен, В., Лян, X. Х., Сан, Х., Де Хойос, С. Л. и Крук, С. Т. Истощение днРНК NEAT1 ослабляет ядерный стресс путем высвобождения секвестрированных P54nrb и PSF для облегчения трансляции c-Myc. PLoS ONE 12 , e0173494 (2017).

    Артикул Google Scholar

  • 31.

    Takeuchi, A. et al.Потеря Sfpq вызывает транскриптопатию длинных генов в головном мозге. Cell Rep. 23 , 1326–1341 (2018).

    CAS Статья Google Scholar

  • 32.

    Stanton, R. et al. Исследование химической модификации антисмысловых гэпмеров. Nucleic Acid Ther. 22 , 344–359 (2012).

    CAS Статья Google Scholar

  • 33.

    Хагедорн, П.H. et al. Гепатотоксический потенциал терапевтических олигонуклеотидов можно предсказать на основании их последовательности и характера модификации. Nucleic Acid Ther. 23 , 302–310 (2013).

    CAS Статья Google Scholar

  • 34.

    Шен, В., Лян, X. Х., Сан, Х. и Крук, С. Т. 2’-Фтор-модифицированный фосфоротиоатный олигонуклеотид может вызывать быстрое разложение P54nrb и PSF. Nucleic Acids Res. 43 , 4569–4578 (2015).

    CAS Статья Google Scholar

  • 35.

    Liang, X., Shen, W., Sun, H., Prakash, T.P. & Crooke, S.T. Комплексные белки TCP1 взаимодействуют с фосфоротиоатными олигонуклеотидами и могут совместно локализоваться в индуцированных олигонуклеотидами ядерных тельцах в клетках млекопитающих. Nucleic Acids Res. 42 , 7819–7832 (2014).

    CAS Статья Google Scholar

  • 36.

    Wang, S. et al. Клеточное поглощение, опосредованное рецептором эпидермального фактора роста, способствует внутриклеточной активности фосфоротиоат-модифицированных антисмысловых олигонуклеотидов. Nucleic Acids Res. 46 , 3579–3594 (2018).

    CAS Статья Google Scholar

  • 37.

    Kasuya, T. & Kugimiya, A. Роль компьютерно оцененной целевой специфичности в гепатотоксичности антисмысловых олигонуклеотидов гэпмеров. Nucleic Acid Ther. 28 , 312–317 (2018).

    CAS Статья Google Scholar

  • 38.

    Henry, S.P. et al. в Технология антисмысловых лекарств — принципы, стратегии и приложения 2-е изд. (изд. Crooke, S. T.) 305–326 (CRC Press, 2008).

  • 39.

    Polymenidou, M. et al. Истощение длинных пре-мРНК и неправильное определение РНК способствуют уязвимости нейронов из-за потери TDP-43. Nat.Neurosci. 14 , 459–468 (2011).

    CAS Статья Google Scholar

  • 40.

    Lagier-Tourenne, C. et al. Дивергентные роли ALS-связанных белков FUS / TLS и TDP-43 пересекаются в процессинге длинных пре-мРНК. Nat. Neurosci. 15 , 1488–1497 (2012).

    CAS Статья Google Scholar

  • 41.

    King, I. F. et al. Топоизомеразы способствуют транскрипции длинных генов, связанных с аутизмом. Природа 501 , 58–62 (2013).

    CAS Статья Google Scholar

  • 42.

    Шав-Тал Ю. и Зипори Д. PSF и p54 (nrb) / NonO — многофункциональные ядерные белки. FEBS Lett. 531 , 109–114 (2002).

    CAS Статья Google Scholar

  • 43.

    Кох Т., Шим И., Линдоу М., Орум Х. и Бор Х. Г. Квантово-механические исследования ДНК и LNA. Nucleic Acid Ther. 24 , 139–148 (2014).

    CAS Статья Google Scholar

  • 44.

    Gao, W. Y., Han, F. S., Storm, C., Egan, W. & Cheng, Y. C. Фосфоротиоатные олигонуклеотиды являются ингибиторами ДНК-полимераз человека и РНКазы H: значение для антисмысловой технологии. Мол. Pharmacol. 41 , 223–229 (1992).

    CAS PubMed Google Scholar

  • 45.

    Shen, W. et al. Динамическая нуклеоплазматическая и ядрышковая локализация РНКазы h2 млекопитающих в ответ на R-петли транскрипции RNAP I. Nucleic Acids Res. 45 , 10672–10692 (2017).

    CAS Статья Google Scholar

  • 46.

    Lima, W. F. et al. Жизнеспособные мыши с нокаутом RNaseh2 показывают, что RNaseh2 важен для процессинга R-петли, функции митохондрий и печени. Nucleic Acids Res. 44 , 5299–5312 (2016).

    CAS Статья Google Scholar

  • 47.

    Ostergaard, M. E. et al. Эффективный синтез и биологическая оценка антисмысловых олигонуклеотидов, конъюгированных с 5’-GalNAc. Bioconjug. Chem. 26 , 1451–1455 (2015).

    Артикул Google Scholar

  • 48.

    Либхабер, С. А., Вольф, С. и Шлессингер, Д. Различия в метаболизме рРНК первичных и трансформированных SV40 фибробластов человека. Cell 13 , 121–127 (1978).

    CAS Статья Google Scholar

  • 49.

    Wu, H. et al. Определение роли РНКазы h2 человека в фармакологии ДНК-подобных антисмысловых препаратов. J. Biol. Chem. 279 , 17181–17189 (2004).

    CAS Статья Google Scholar

  • 50.

    Wu, H., Sun, H., Liang, X., Lima, W.F. & Crooke, S. T. Человеческая РНКаза h2 связана с белком P32 и участвует в процессинге пре-рРНК митохондрий. PLoS ONE 8 , e71006, 71001–71015. (2013).

    Google Scholar

  • Границы | ZmRAP2.7, фактор транскрипции AP2, участвует в развитии корней растяжек кукурузы

    Введение

    Корни являются важными органами для исследования и эксплуатации почвенных ресурсов, таких как вода и минеральные питательные вещества, а также для закрепления (Lynch, 1995, 2007; Hodge et al., 2009). Архитектура корневой системы (RSA) имеет фундаментальное значение для роста и продуктивности сельскохозяйственных культур, особенно в условиях абиотического стресса (de Dorlodot et al., 2007). Кукуруза ( Zea mays L.) является одной из наиболее важных пищевых и кормовых культур, и ее продуктивность чувствительна к дефициту питательных веществ, стрессу засухи и полеганию корней в популяциях с высокой плотностью населения (Mueller et al., 2012; Lobell et al. др., 2014; Сюэ и др., 2017). Имитационное исследование в кукурузном поясе США показало, что историческая тенденция урожайности кукурузы может быть объяснена улучшением корневой системы (Hammer et al., 2009). Считается, что глубокая корневая система оптимальна для поглощения воды и азота, в то время как неглубокая корневая система подходит для поглощения фосфора (Lynch, 2011, 2013). Однако, поскольку трудно оценить признаки корней в полевых условиях, селекционеры редко рассматривают признаки корней в качестве критерия отбора (Cai et al., 2012). Следовательно, идентификация QTL или генов RSA необходима для обеспечения ценных мишеней для селекции с помощью маркеров или генетической модификации для продвижения корневого подхода к повышению урожайности сельскохозяйственных культур.

    У кукурузы корневые системы формируются во время эмбриогенеза и постэмбрионального развития (Hochholdinger and Tuberosa, 2009). Постэмбриональные побеговые корни доминируют над всей корневой системой, представляя основные компоненты для получения ресурсов и устойчивости к полеганию взрослых растений. Побеговые корни начинаются в следующих друг за другом узлах побегов и состоят из корончатых корней (CR) из подземных узлов и связующих корней (BR) из надземных узлов (Hochholdinger, 2009).Используя мутант ( rtcs ) кукурузы без корня относительно корня и семенных корней, был идентифицирован ген ZmRTCS для участия в развитии побеговых корней (Taramino et al., 2007). ZmRTCS и его близкий гомолог ZmRTCL оба кодируют белки LOB-домена, которые регулируют инициацию и удлинение побеговых корней, соответственно (Taramino et al., 2007; Xu et al., 2015). Оба гена действуют как нижестоящий фактор ответа на ауксин ZmARF35 , что позволяет предположить роль ауксинового пути в развитии побеговых корней (Xu et al., 2015). Используя популяцию теозинте-кукурузы, было обнаружено, что ген ZmCCT во время цветения контролирует количество побеговых корней (Zhang et al., 2018). У взрослых растений кукурузы развитые корни, проросшие в почву, в основном отвечают за поглощение питательных веществ и воды и препятствуют полеганию. Анатомический, морфологический и транскриптомический паттерн корней растяжек значительно отличался от таковых корневых корней, что свидетельствует о генетических различиях между этими двумя типами корней кукурузы (Li et al., 2011; Ю. и др., 2015, 2016). Были нанесены на карту некоторые QTL для признаков корней скоб (Cai et al., 2012; Ku et al., 2012; Gu et al., 2016), но лежащие в основе гены еще не идентифицированы. Ген транспортера множественной лекарственной экструзии и токсина (MATE) может способствовать развитию растяжек корней, поскольку соответствующий мутант big embryo1 обнаруживает большее количество растяжек корней, чем растения дикого типа (Suzuki et al., 2015). Тем не менее, молекулярный механизм развития корнеплодов до сих пор недостаточно изучен.

    Было обнаружено, что некоторые факторы транскрипции AP2 участвуют в регуляции развития корневых корней у риса (Zhao et al., 2009; Kitomi et al., 2011). Например, CROWNROOTLESS5 ( CRL 5) участвует в инициации корневых корней (Kitomi et al., 2011), а другой фактор транскрипции AP2, ERF3 , может взаимодействовать с WOX11 для контроля инициации и развития коронковых корней ( Чжао и др., 2009, 2015). Факторы транскрипции AP2 принадлежат к большому семейству генов факторов транскрипции растений, которые содержат высококонсервативный ДНК-связывающий домен AP2 / ERF.Члены AP2 были разделены на четыре подсемейства: AP2, RAV (связанный с ABI3 / VP1), белок, связывающий элемент, реагирующий на дегидратацию (DREB) и ERF (Yamaguchi-Shinozaki and Shinozaki, 2006; Dietz et al., 2010; Sharoni et al., 2011; Mizoi et al., 2012). Филогенетический анализ предсказал в общей сложности 184 AP2-подобных гена в геноме кукурузы (Du et al., 2014), и ни один из них не регулирует развитие корней.

    Кукуруза Corngrass1 мутант с повышенной экспрессией miR156 демонстрировал больше корней растяжения (Chuck et al., 2007а). Будучи нижестоящим от miR156, miR172 подавляется в Corngrass1 (Chuck et al., 2007b). Поскольку некоторые члены факторов транскрипции AP2 / ERF (AP2) действуют как мишени для miR172 , путь miR156-miR172-AP2 был предложен в качестве регуляторного пути, который контролирует время фазового перехода от ювенильного организма к взрослому и впоследствии влияли на время цветения и развитие цветков (Irish, 1997; Chuck et al., 2007a, b; Buckler et al., 2009; Castelletti et al., 2014). Поскольку повышенная экспрессия гена AP2 , ZmRAP2.7 , в качестве мишени для miR172 , наблюдалась в узле с растяжкой Corngrass1 , мы тогда заподозрили роль ZmRAP2.7 в развитие корнеплодов кукурузы. Белок, кодируемый ZmRAP2.7 , был локализован в ядре с активностью активации транскрипции. Мутант кукурузы RAP2.7-Mu , дефектный по экспрессии ZmRAP2.7 , обнаружил пониженное количество корней.Таким образом, это открытие предполагает функцию ZmRAP2.7 в развитии корней кукурузы.

    Материалы и методы

    Запасы растений и условия роста

    Мутант со вставкой Mu-транспозона ZmRAP2.7 (Stock ID: UFMu-00629; Locus ID: mu1019979), названный RAP2.7-Mu , был получен в рамках проекта Uniform-Mu в Центре сотрудничества генетики кукурузы. (Маккарти и др., 2005). Соответствующую инбредную линию дикого типа W22 выращивали в теплице с контролируемым климатом (цикл свет-темнота 16/8 ч при температурах 29/24 ° C).Для выделения РНК на стадии шелушения отбирали разные органы, включая корень, узел с корнями-скобками или без них. Мутант Corngrass1 был депонирован в Фондовый центр сотрудничества в области генетики кукурузы как CG1 (Stock ID: 310D; Chuck et al., 2007a).

    Растения RAP2.7-Mu и W22 выращивали в полевых условиях на экспериментальной станции Шанчжуан (Южная Каролина) (Пекин, N40 ° 08′12,15 ″, E116 ° 10′44,83 ″) летом 2016 и 2017 гг. Экспериментальная станция Санья (SY) (Хайнань, N 18 ° 22′55.83 ″, E109 ° 11′43,94 ″) зимой 2016 года. Образцы листьев были собраны на стадии проростков, а затем геномная ДНК была извлечена для генотипирования. Была высажена сегрегационная популяция BCF 1 от скрещивания линий Corngrass1 и W22, а затем была взята ткань узла с зачатками корней растяжки для выделения РНК.

    Клонирование и анализ последовательности

    ZmRAP2.7

    Эталонная последовательность ZmRAP2.7 ( GRMZM2G700665 ) была идентифицирована из базы данных фитозом.Полноразмерная кДНК ZmRAP2.7 амплифицировали с использованием специфических праймеров, расположенных в областях 5′-UTR и 3′-UTR (дополнительная таблица S1). Затем продукт ПЦР лигировали в вектор CloneSmarter-TOPO (TaiHe Biotechnology, Пекин, Китай) и секвенировали. Структура белка, кодируемого ZmRAP2.7 , была предсказана SMART. Вторичная структура была предсказана PSIPRED, а третичная структура — SWISS-MODEL.

    Субклеточная локализация белка ZmRAP2.7

    Кодирующая последовательность ZmRAP2.7 был клонирован в сайты BamHI и EcoRI вектора временной экспрессии pEZS-NL под контролем промотора 35S для создания конструкции pEZS-35S: ZmRAP2.7-EGFP (Zuo et al., 2015 ). Протопласты кукурузы выделяли из этиолированных проростков кукурузы инбредного B73 для трансформации, как описано Yoo et al. (2007). После инкубации при 24 ° C в течение 12 ч в темноте флуоресценцию GFP в трансформированных протопластах визуализировали с помощью конфокального сканирующего лазерного инвертированного микроскопа LSM510 META (Carl Zeiss, Jena, Germany).

    Анализ трансактивационной активности белка ZmRAP2.7

    кДНК ZmRAP2.7 клонировали в сайты EcoRI и BamHI вектора pGBKT7 для создания конструкции pGBKT7-ZmRAP2.7 . Затем этой плазмидой с пустым векторным контролем трансформировали штамм дрожжей Ah209 для анализа трансактивационной активности. Трансформанты дрожжей с OD600 0,1 высевали на различные селективные среды, SD / -Trp и SD / -Trp-His, и инкубировали при 30 ° C в течение 3 дней.

    Филогенетический анализ ZmRAP2.7

    Для анализа филогенетического дерева ZmRAP2.7 из базы данных были получены пептидные последовательности выбранных членов подсемейства факторов транскрипции AP2 из Oryza sativa, Sorghum bicolor, Populus trichocarpa и Arabidopsis thaliana . Пептидные последовательности 28 членов AP2 кукурузы были получены из базы данных PlantTFDB. Выравнивание последовательностей выполняли с помощью программного обеспечения DNAMAN, MEGA (версия 6) (Tamura et al., 2007) и ClustalX2.0 (Larkin et al., 2007).Филогенетическое дерево было построено с использованием метода объединения соседей (Saitou and Nei, 1987).

    Анализ экспрессии генов

    Тотальную РНК выделяли с использованием реагента Trizol (Takara, Dalian, China) и обрабатывали ДНКазой I для устранения загрязнения геномной ДНК. КДНК амплифицировали с использованием набора реагентов PrimeScript ™ RT с наборами для удаления гДНК (Takara, Dalian, China). Экспрессию ZmRAP2.7 анализировали методом qRT-PCR (Bio-Rad, Hercules, CA, США) с использованием флуоресцентного красителя для интеркалирования ДНК SYBR Green I Master Mix (TAKARA, Далянь, Китай).Были сконструированы ген-специфические олигонуклеотидные праймеры для анализа экспрессии генов, а эффективность и специфичность праймеров-кандидатов исследовали с помощью анализа кривой плавления от 55 до 99 ° C. Все последовательности праймеров перечислены в дополнительной таблице S1. Было выполнено три биологических повтора и три технических повтора. Программа термоциклирования была следующей: 40 циклов при 95 ° C в течение 3 минут, 95 ° C в течение 10 с и 58 ° C в течение 30 секунд. Уровни экспрессии были нормализованы для гена кукурузы убикилин-1 ( ZmUBQ1 ) в качестве внутреннего контроля, и данные были проанализированы на основе сравнительной формулы 2-ΔΔCT (Livak and Schmittgen, 2001).

    Идентификация линии введения транспозона Mu

    RAP2.7-Mu

    Генотип кукурузы идентифицировали методом, описанным Settles et al. (2007). Два ген-специфичных праймера AP2SF и AP2SR были сконструированы рядом с предсказанной последовательностью положения вставки в хромосоме 8 (131 577 941 ~ 131 577 949) (B73 RefGen_v3). В сочетании с Mu-TIR-специфическим праймером TIR6 (McCarty et al., 2005) фрагменты транспозона были амплифицированы и соответствующий сайт встраивания был проверен.Генотипы растений анализировали с использованием наборов праймеров AP2SF + AP2SR и AP2SR + TIR6, а затем идентифицировали гомозиготные по дикому типу или мутанту и гетерозиготу (дополнительная фигура S1).

    Фенотипирование корня

    Количество побеговых корней, включая корни растяжки и корни кроны, оценивали для различных генотипов кукурузы ( RAP2.7-Mu, Corngrass1 и соответствующие дикие типы) с помощью модифицированного метода «лопатомики» (Trachsel et al. др., 2011). Корни выращиваемых в поле кукурузы выкапывали и затем очищали путем удаления почвы.Каждый корень связки и корень коронки вырезали в соответствии с порядком расположения узлов и подсчитывали количество корней. Порядок оборотов регистрировался от нижних к верхним узлам (дополнительный рисунок S2). Достоверная разница между разными генотипами была определена с помощью тестов Стьюдента t ( * p ≤ 0,05; ** p ≤ 0,01; *** p ≤ 0,001).

    Анализ ассоциации генов-кандидатов

    ZmRAP2.7 с признаками корня на панели AM508

    Панель ассоциации кукурузы, состоящая из 508 различных инбредных линий (AM508), была использована для анализа признаков количества подкорневых и корончатых корней в полевых условиях (Li et al., 2013). Фенотип корней каждой инбредной линии оценивали на экспериментальной станции Шанчжуан (SZ) (Пекин, N40 ° 08′12,15 ″, E116 ° 10′44,83 ″) и экспериментальной станции Quzhou (QZ) (Хэбэй, N36 ° 51′48,55 ″, E115. ° 00′58,62 ″) летом 2012 года. На каждом участке все линии были высажены на однорядные участки с неполностью случайным образом. Каждый ряд имел длину 4 м, ширину 0,5 м и содержал 17 растений. Оценивали признаки корней пяти случайно выбранных растений в каждом ряду. Для анализа ассоциации использовались лучшие значения линейного несмещенного предиктора (BLUP) из двух местоположений.Полиморфизмы (однонуклеотидный полиморфизм, SNP) ZmRAP2.7 были получены из базы данных, и их связь с исследуемыми признаками была рассчитана с помощью TASSEL5.0 в рамках стандартного MLM с MAF ≥ 0,05.

    Результаты

    Повышенная экспрессия

    ZmRAP2.7 в Corngrass1 Выявлено больше корней скобы

    У мутанта кукурузы Corngrass1 развилось больше корней, чем у соответствующего дикого типа (рис. 1А). В поле количество побеговых корней в среднем составляло 122.3 в Corngrass1 , что примерно в шесть раз больше, чем у растений дикого типа (рис. 1B). Повышенное количество побеговых корней у Corngrass1 в основном объяснялось корнями растяжек, в то время как количество корневых корней было одинаковым для двух генотипов. Предыдущее исследование показало, что в Corngrass1 экспрессия miR156 была повышена и впоследствии репрессировалась miR172 (Navarro et al., 2017). Затем предполагалось, что ZmRAP2.7 , один из предполагаемых генов-мишеней для miR172 , активируется в Corngrass1 и, вероятно, отвечает на фенотип корней скоб.

    Рисунок 1 . Повышенное количество корней у мутанта Corngrass1 . (A) Мутантные растения Corngrass1 и растения дикого типа выращивали в теплице в течение 68 дней. Верхние узлы у Corngrass1 все еще сохраняются в ювенильной фазе и инициируют ростковые корни. (B) Количество побеговых корней, которые состоят из связочных и корончатых корней, у выращиваемых в полевых условиях мутантных растений Corngrass1 и растений дикого типа на зрелой стадии. Столбцы указывают среднее значение (± стандартное отклонение) ( n = 6).Значительная разница в каждой группе была отмечена звездочкой ( *** p <0,001) в соответствии с тестами Стьюдента t .

    Для определения функции ZmRAP2.7 в развитии корней кукурузы, паттерн экспрессии ZmRAP2.7 в различных органах был исследован из базы данных (геном B73 V3, https://www.maizegdb.org/). ZmRAP2.7 Уровни экспрессии были в изобилии во всех типах корней, включая первичные, семенные и побеговые корни (дополнительный рисунок S3).Мы дополнительно исследовали экспрессию ZmRAP2.7 в корне (R), узле с подкорневыми корнями (NBR) и узле без подкорневых корней (N) растений на стадии шелушения (дополнительный рисунок S4). Опять же, ZmRAP2.7 показал самые высокие уровни экспрессии в корнях. Примечательно, что экспрессия ZmRAP2.7 в узле с зачатками связочных корней была примерно в 10 раз выше, чем в узле без зачатков связочных корней (рис. 2A), что позволяет предположить, что ZmRAP2.7 может функционировать в связочных корнях. разработка.Более того, в развитых узлах на стадии шелушения экспрессия ZmRAP2.7 в Corngrass1 была примерно в 30 раз выше, чем у дикого типа (рис. 2В). Таким образом, повышенная экспрессия ZmRAP2.7 в узле может объяснять большее количество корней в Corngrass1 .

    Рисунок 2 . Предпочтительная экспрессия ZmRAP2.7 в узлах инициировала фиксацию корней и активацию мутанта Corngrass1 . (A) Относительные уровни экспрессии ZmRAP2.7 в корне (R), узлы с растяжками (NBR) и узлы без подкорней (N) у выращиваемых в поле растений дикого типа на стадии цветения. Столбцы указывают среднее значение (± стандартное отклонение) ( n = 3). Существенная разница была обозначена разными буквами согласно критерию Тьюки. (B) Относительные уровни экспрессии ZmRAP2.7 в узлах выращенных в полевых условиях мутантных растений Corngrass1 и растений дикого типа на стадии цветения. Столбцы указывают среднее значение (± стандартное отклонение) ( n = 3). Существенная разница отмечена звездочкой ( ** p <0.01) по результатам теста Стьюдента t .

    Согласно филогенетическому анализу, ZmRAP2.7 ( GRMZM2M2G700665 ) и близкий гомолог ZmEREB81 ( GRMZM2G416701 ) были отнесены к кластеру I и (ts62) ts6 ( сестра неопределенного колоска 1, GRMZM5G176175 ) в кластер II (рис. 3A). Кластеры I и II, вероятно, были вызваны дублированными сегментами генома Poaceae , происходящими из наследственной дупликации всего генома (рис. 3B).Пара из двух генов в каждом кластере возникла в результате аллотетраплоидизации генома. В кластере II и ts6 , и sid1 были генами-мишенями для miR172 и функционировали в идентичности органов цветков (http://www.mirbase.org/; Chuck et al., 2007b). ts6 и sid1 были конститутивно экспрессированы в большинстве органов, как показывает база данных (http://www.maizegdb.org/; Stelpflug et al., 2016) (дополнительный рисунок S3). В кластере I оба ZmRAP2.7 и ZmEREB81 были высоко экспрессированы в корнях. Поскольку ZmEREB81 потерял целевой сайт miR172 , предполагалось, что ZmRAP2.7 является геном-кандидатом для регуляции развития корня.

    Рисунок 3 . Филогенетическое дерево и сравнительный анализ генома ZmRAP2.7 и его гомологов у разных видов трав. (A) Филогенетическое дерево было построено с использованием программного обеспечения MEGA. GRMZM2M2G700665 ( ZmRAP2.7 ), Sobic.009G024600, GRMZM2G416701 ( ZmEREB81 ), Os05G03040, и Bradi2G37800 были назначены в кластер I. Sobic.001G036800, Os03G60430 и Bradi1G03880 были отнесены к кластеру II. (B) Схематическое изображение положений хромосом ZmRAP2.7 и генов-гомологов в рамках межвидовой и внутривидовой коллинеарности Poaceae .Кластеры I и II являются результатом дублированных сегментов генома Poaceae , происходящих из наследственной дупликации всего генома (SD), и пары двух генов в каждом кластере из аллотетраплоидизации генома (AT). Гены, содержащие целевые сайты miR172, отмечены звездочкой.

    Количество корней скобок уменьшилось в

    ZmRAP2.7 Мутант, связанный с введением транспозона

    Чтобы проверить роль ZmRAP2.7 в развитии корней скоб, мы охарактеризовали мутант со вставкой Mu-транспозона ( RAP2.7-Mu ), в котором была нарушена экспрессия ZmRAP2.7 . Посредством секвенирования продуктов ПЦР, амплифицированных из Mu-специфических праймеров и специфичных для гена ZmRAP2.7 , было обнаружено, что транспозон Mu встроен во второй экзон гена ZmRAP2.7 в области от +626 до +634 п.н. повторяющаяся последовательность 5′-GCGGCAAGC-3 ‘(рис. 4А). Путем полуколичественного анализа RT-PCR образца корня проростков экспрессия ZmRAP2.7 в растениях дикого типа была выявлена ​​как очевидная полоса, в то время как в RAP2 сигнал не был обнаружен.7-Mu (Рисунок 4Б). Таким образом, этот результат показал, что экспрессия ZmRAP2.7 была полностью нарушена в RAP2.7-Mu путем вставки транспозона в кодирующую последовательность.

    Рисунок 4 . Выделение мутанта со вставкой транспозона RAP2.7-Mu , дефектного по экспрессии ZmRAP2.7 . (A) Транспозон Mu был вставлен во второй экзон гена ZmRAP2.7 в положении между +626 и +634 п.н. с двумя повторами по 9 п.н. 5′-GCGGCAAGC-3 ‘.Целевая последовательность miR172 была расположена в девятом экзоне в положении между +1 292 и 13 12 п.н. Генотипы анализировали с использованием наборов праймеров AP2SF + AP2SR и AP2SR + TIR6. (B) Уровни экспрессии ZmRAP2.7 в корнях RAP2.7-Mu и соответствующих растений дикого типа, выращенных в горшках.

    Затем сравнивали количество побеговых корней, включая связочные и корончатые корни между RAP2.7-Mu и соответствующими растениями дикого типа в полевых условиях.Чтобы исключить возможное влияние других вставок или геномных модификаций на исследуемые признаки в RAP2.7-Mu , мы создали F 2 , разделяющую популяции из скрещивания ZmRAP2.7-Mu и W22 дикого типа. Затем была проанализирована ассоциация между аллелем ZmRAP2.7-Mu и фенотипом корня. В полевых испытаниях на SZ2016 путем генотипирования каждого индивидуума в популяции F 2 мы получили 28 растений с гомозиготным ZmRAP2.Аллель 7-Mu (- / -), 60 растений с гетерозиготным аллелем ZmRAP2.7-Mu (- / +) и 23 растения с гомозиготным аллелем дикого типа (+ / +), с коэффициентом сегрегации 1 : 2: 1. В среднем, у гомозиготных растений RAP2.7-Mu было на 8,6% меньше побеговых корней (89,4), чем у растений с аллелем дикого типа (97,8) (рисунки 5A, B), в то время как различий между ними не наблюдалось. гетерозиготный и аллель дикого типа. Таким образом, это указывает на уменьшение количества корней в ZmRAP2.7-Mu возник в результате рецессивной мутации в ZmRAP2.7 . Количество коронковых корней в каждом обороте (W1 – W8) было одинаковым для обоих генотипов. Напротив, меньшее количество корней, наблюдаемое у растений RAP2.7-Mu , в основном объясняется на один оборот меньше (W9, W10), чем у растений дикого типа (W9 – W11). Следовательно, нарушение экспрессии ZmRAP2.7 значительно ингибировало развитие корней корня, а не корня корня. Кроме того, гомозиготный RAP2.7-Mu также показал более раннее время отделения пыльцы, чем гомозиготный дикий тип (на 8 дней раньше в SZ2016 и на 4 дня в SZ2017) (дополнительная таблица S3).Помимо развития корней, роль ZmRAP2.7 во время цветения также была подтверждена, как описано Salvi et al. (2007).

    Рисунок 5 . Уменьшение количества корней у мутанта RAP2.7-Mu , что выявлено сегрегирующей популяцией F 2 . (A) Фенотип развития корней растяжки у мутантных растений RAP2.7-Mu и растений W22 дикого типа, выращенных в поле на стадии зрелости (75 дней после посева). Разница в корнях между двумя генотипами была отмечена красной стрелкой. (B) Число подкорневых и корончатых корней растений кукурузы, выращенных в Шанчжуане (2016) на стадии зрелости (75 дней после посева). Мутант RAP2.7-Mu и растения W22 дикого типа были генотипически отобраны из сегрегирующей популяции F 2 . Оборот, соответствующий номерам узлов в порядках, обозначен как W1 – W11. Столбцы указывают среднее значение (± стандартное отклонение) ( n = 23–28). Значимые различия внутри каждой группы отмечены звездочкой ( ** p <0.01; *** p <0,001) согласно тестам Стьюдента t .

    Для подтверждения корневого фенотипа RAP2.7-Mu мы дополнительно сгенерировали семейства F 2: 3 либо из гомозиготных RAP2.7-Mu , либо из гомозиготных растений дикого типа. Фенотипы корней оценивали в SY2016 и SZ2017. В SY2016 RAP2.7-Mu показал в среднем около 42,0 побеговых корней, что составляет около 14% значительного сокращения по сравнению с диким типом (рис. 6).Растения дикого типа развили связочные корни на восьмом обороте (W8), в то время как RAP2.7-Mu не смог инициировать связочные корни на том же обороте (рис. 6). Количество корневых корней (W1 – W7) было одинаковым для обоих генотипов. По сравнению с растениями в SY2016, количество побеговых корней, в основном у растяжек, значительно увеличилось в SZ2017, что указывает на то, что на развитие растяжек также влияет окружающая среда. Тем не менее количество побеговых корней в RAP2.7-Mu (72.5) также снизился на 12% по сравнению с диким типом (82,7) (рис. 6). Опять же, уменьшение в основном объяснялось меньшим количеством корней на 10-м обороте (W10). Кроме того, сухой вес корней показал снижение примерно на 70% у растений RAP2.7-Mu , в то время как сухой вес побегов оставался одинаковым для двух генотипов (дополнительный рисунок S5). В совокупности эти результаты показали, что ZmRAP2.7 участвовал в развитии корней связки, а не корончатых корней.

    Рисунок 6 .Уменьшение количества растяжек у мутанта RAP2.7-Mu , что выявлено семьями F 2: 3 . Количество подкорневых и корончатых корней растений кукурузы, выращиваемых в Санья (SY2016) и Шанчжуан (SZ2017) на стадии созревания (примерно через 78 дней после посева). Сравнивали растения семейства F 2: 3 мутанта RAP2.7-Mu и W22 дикого типа. Оборот, соответствующий номерам узлов в порядках, обозначен как W1 – W10. Столбцы указывают среднее значение (± стандартное отклонение) ( n = 36). Значимые различия внутри каждой группы отмечены звездочкой ( *** p <0.001) по результатам теста Стьюдента t .

    Затем был проведен анализ ассоциации генов-кандидатов для ZmRAP2.7 на панели кукурузы (AM508), состоящей из 508 различных линий (рис. 7). Аллельная вариация ZmRAP2.7 среди этих генотипов была извлечена согласно соответствующим SNP из базы данных (Yang et al., 2011). Среди этих линий было идентифицировано 49 SNP, охватывающих 5′- и 3′-нетранслирующие области (UTR), и 9 экзонов ZmRAP2.7 .Используя смешанную линейную модель, SNP1499 , который расположен в пятом экзоне гена ZmRAP2.7 , выявил значительную связь с количеством корней скоб (рис. 7). Этот SNP1499 может вносить вклад в 12,5% фенотипической изменчивости в популяции. Напротив, SNP1499 не был связан с количеством корневых корней, что согласуется с ролью ZmRAP2.7 в развитии растяжек, как выявлено с помощью анализа мутантов. Кроме того, любимые вариации аллелей идентифицированы в ZmRAP2.7 может способствовать созданию молекулярного маркера для выбора признаков корней растяжки.

    Рисунок 7 . Естественная изменчивость гена ZmRAP2.7 была достоверно связана с количеством корней в ассоциативной панели кукурузы (AM508). (A) Картирование ассоциации на основе ZmRAP2.7 и анализ парного неравновесия по сцеплению (LD). Точки представляют собой SNP. Вариант SNP в пятом экзоне ( SNP1499 ), связанный с количеством корней скоб, был выделен красным. (B) Количество корневых корней и корней в гаплотипах ZmRAP2.7 (аллели GG и CC в SNP1499 ). n обозначает количество генотипов, принадлежащих каждой группе гаплотипов. Значимое различие в каждой группе было указано звездочкой ( ** p <0,01) в соответствии с тестами Стьюдента t , и отсутствие значимого было указано как n.s.

    ZmRAP2.7 локализован в ядре и выявляет транскрипционную активность

    Модель ZmRAP2.7 Ген содержал открытую рамку считывания размером 1413 п.н. и кодирует предсказанный белок из 470 аминокислот с предсказанной молекулярной массой 51,66 кДа. Было предсказано, что белок ZmRAP2.7 содержит две α-спирали (дополнительные рисунки S6A, B) с двумя консервативными доменами AP2 / ERF (153–215 аминокислотных остатков и 245–308 аминокислотных остатков) (дополнительный рисунок S6C). Таким образом, белок ZmRAP2.7 был предсказан как один из членов семейства факторов транскрипции AP2.

    Для исследования субклеточной локализации ZmRAP2.7 полноразмерные ORF ZmRAP2.7 были слиты с EGFP и временно экспрессировались в протопластах листьев кукурузы (фиг. 8A). В отличие от флуоресценции GFP во всей клетке, ZmRAP2.7-зависимая зеленая флуоресценция в основном локализовалась в ядре (рис. 8A), что указывает на ядерную локализацию белка ZmRAP2.7. Штаммы дрожжей, трансформированные с помощью pGBKT7-ZmRAP2.7 , были способны расти на выбранной среде SD / -Trp / -His, в которой эти красители с пустым вектором pGBDKT7 не могли расти (фигура 8B).Этот результат указывает на то, что ZmRAP2.7 проявляет транскрипционную активность, предполагая роль ZmRAP2.7 как активатора транскрипции.

    Рисунок 8 . ZmRAP2.7 локализован в ядре с транскрипционной активностью. (A) Ядерная локализация белка ZmRAP2.7 в кукурузе. Конструкции pEZS-35S: EGFP и pEZS-35S: ZmRAP2.7-EGFP временно экспрессировались в протопластах мезофилла кукурузы. ZmRAP2.7-зависимая флуоресценция GFP наблюдалась в ядре.Масштабная линейка представляет 10 мкм. (B) Активация транскрипции ZmRAP2.7 в дрожжах. Конструкции pGKBT7 и pGKBT7-ZmRAP2.7 трансформировали в дрожжах и выращивали в течение 3 дней на выбранной среде, как указано.

    Обсуждение

    Корнеплоды — важный компонент всей корневой системы кукурузы. Врастая в почву, корнеплоды вносят значительный вклад в устойчивость к полеганию и эффективность поглощения воды и питательных веществ.Однако было клонировано несколько генов, отвечающих за развитие корней кукурузы, и механизм, лежащий в основе этого явления, еще предстоит выяснить. В этом исследовании мы охарактеризовали ген фактора транскрипции AP2 кукурузы, ZmRAP2.7 , который играет важную роль в развитии корней растяжки. Кроме того, идентифицированная вариация аллеля ZmRAP2.7 может быть использована для создания ценных маркеров для генетического улучшения свойств корня.

    Несколько свидетельств показали, что ген ZmRAP2.7 участвовал в развитии корней кукурузы.Во-первых, ZmRAP2.7 в основном экспрессировался в корнях (дополнительный рисунок S3) и узлах с инициированными корнями-скобами (рисунок 2A). Во-вторых, изменение экспрессии ZmRAP2.7 привело к изменению количества корней скоб (рис. 1, 2, 4–6). В отличие от растений дикого типа, растения RAP2.7-Mu , дефектные по экспрессии ZmRAP2.7 , показали меньшее количество растяжимых корней (рисунки 4-6), в то время как растения Corngrass1 с повышенной экспрессией ZmRAP2.7 показали большее количество корней связки (Рисунки 1A, 2B).В-третьих, белок ZmRAP2.7 был локализован в ядре и обнаружил транскрипционную активность. Однако нижестоящие гены ZmRAP2.7 и то, как они регулируют развитие корней скоб, остаются в значительной степени неизвестными. Поскольку кукуруза ZmRTCS и ZmRTCL и их вышестоящий регулятор ZmARF35 контролируют развитие побеговых корней (Taramino et al., 2007; Xu et al., 2015), было бы целесообразно исследовать, может ли этот путь регулироваться Автор: ZmRAP2.7 .Кроме того, было обнаружено, что два гена фактора транскрипции AP2 риса ( OsERF3 и OsCRL5 ) контролируют инициирование и удлинение корня кроны побегов путем регулирования регуляторов ответа (RR) передачи сигналов цитокининов (Zhao et al., 2009, 2015 ; Kitomi et al., 2011). Таким образом, ZmRAP2.7 может также регулировать цитокининовый путь, контролирующий развитие побеговых корней кукурузы.

    Многие предыдущие исследования кукурузы продемонстрировали, что ген ZmRAP2.7 является негативным регулятором времени цветения, как показал анализ ассоциации на уровне всего генома (Buckler et al., 2009), QTL-анализ (Castelletti et al., 2014) и трансгенный анализ (Salvi et al., 2007). У трансгенных линий кукурузы, сверхэкспрессирующих ZmRAP2.7 , обнаруживается отсроченное время цветения, а также увеличение количества узлов (Salvi et al., 2007). Между тем, SNP, расположенные в геномной области ZmRAP2.7 , как было обнаружено, в значительной степени связаны с количеством узлов в популяции вложенных ассоциаций (NAM) (Wallace et al., 2014). Таким образом, помимо времени цветения можно предположить роль ZmRAP2.7 в регулировании количества узлов.Изменения экспрессии ZmRAP2.7 в растениях Corngrass1 или RAP2.7-Mu приводили к изменениям количества корней, связанных с номерами узлов (рисунки 1, 5, 6). Поскольку miR156 и miR172 пути контролируют переход между ювенильной и взрослой стадиями (Lauter et al., 2005; Chuck et al., 2007b; Yang et al., 2011; Navarro et al., 2017), нижестоящий ген ZmRAP2.7 может функционировать в поддержании стеблевых узлов на ювенильной стадии, чтобы поддерживать их меристематическую способность к развитию корней скоб.

    Поскольку ZmRAP2.7 участвовал в контроле как развития растяжек, так и времени цветения, можно было ожидать плейотропного эффекта ZmRAP2.7 . Используя панель ассоциации кукурузы (AM508), было обнаружено, что количество подкорневых корней в значительной степени связано с несколькими признаками развития, включая дату колошения, шелушение и сбрасывание пыльцы (дополнительная таблица S2; Li et al., 2013; Yang et al. , 2014). Эта фенотипическая корреляция предполагает генетическую связь между корнями и развитием цветков у кукурузы, что может быть объяснено функцией плейотропии ZmRAP2.7 в обоих процессах развития. В самом деле, растения RAP2.7-Mu показали более раннее время цветения и меньшее количество корней растяжки (рисунки 5, 6; дополнительная таблица S3). Анализ QTL популяции теозинте-кукурузы также установил генетическую связь между количеством побеговых корней и временем цветения и идентифицировал ZmCCT ген, ко-регулирующий оба признака (Zhang et al., 2018). Аналогичный случай был также обнаружен у пшеницы и ячменя, когда потеря функции VERNALIZATION1 ( VRN1 ) приводит к увеличению времени цветения и фенотипов корней (Deng et al., 2015; Voss-Fels et al., 2017).

    Однако функции ZmRAP2.7 в корнях растяжек и развитии цветков могут регулироваться независимо. В пределах AM508, SNP1499 в значительной степени ассоциировался с количеством подкорневых корней, но не ассоциировался с датой колошения, шелушения и сбрасывания пыльцы (дополнительный рисунок S7). Предыдущие исследования показали, что переход от вегетативного к генеративному 1 ( Vgt1 ), некодирующая область размером 2 Кб, расположенная на 70 Кб выше ZmRAP2.7 , может функционировать как цис-действующий регуляторный элемент для репрессии уровня экспрессии ZmRAP2.7 и приводить к более раннему времени цветения (Salvi et al., 2007; Castelletti et al., 2014; Navarro et al., 2017 ). Действительно, в пределах AM508 аллельная вариация Vgt1 также может вносить вклад в фенотипические вариации времени цветения. Однако аллельная вариация Vgt1 не была связана с количеством корней растяжения (дополнительный рисунок S8). Таким образом, отчетливая аллельная вариация ZmRAP2.7 можно предположить, что он регулирует развитие корней или цветков независимо, но лежащий в основе механизм еще предстоит выяснить.

    В совокупности это исследование охарактеризовало фактор транскрипции AP2 кукурузы, ZmRAP2.7, с важными функциями в развитии корнеплодов. ZmRAP2.7 может стимулировать развитие корней растяжки, а также подавлять время цветения. Кроме того, естественные вариации ZmRAP2.7 , связанные с корневыми признаками, позволяют разработать молекулярные маркеры для улучшения корневой системы кукурузы.

    Доступность данных

    Наборы данных, созданные для этого исследования, доступны по запросу соответствующему автору.

    Авторские взносы

    JL и LY разработали и разработали эксперименты. JL провел большую часть экспериментов. FC провел полевые испытания. YL и YW генотипировали и фенотипировали мутант RAP2.7-Mu . PL собрал фенотипы корней на панели кукурузы AM508. JL и LY проанализировали данные и написали рукопись. GM помог отредактировать рукопись.Все авторы прочитали и подтвердили рукопись.

    Финансирование

    Работа выполнена при финансовой поддержке Национальной программы ключевых исследований и разработок Китая (№ 2016YFD0100700) и Национального фонда естественных наук Китая (№№ 31430095, 31471934 и 31572186).

    Заявление о конфликте интересов

    Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

    Благодарности

    Мы благодарим профессора Сяохун Янга из Китайского сельскохозяйственного университета за любезную поддержку данных об аллельной вариации Vgt1 в панели AM508. Мы благодарим рецензентов за их критическое прочтение и конструктивные комментарии к рукописи.

    Дополнительные материалы

    Дополнительные материалы к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fpls.2019.00820/full#supplementary-material

    Сокращения

    AT, Аллотетраплоидизация; BR — корни растяжки; CG1 , Corngrass1 ; CR — корончатые корни; CRL 5, CROWNROOTLESS5 ; LD — нарушение равновесия по сцеплению; QTL — Локус количественного признака; RR, регуляторы ответа цитокининовой передачи сигналов; RSA, архитектура корневой системы; rtcs , Безкорневые относительно коронки и семенных корней ; SD, сегменты дублированы; SNP, однонуклеотидный полиморфизм; Тп1 , Теопод1 ; Тп2 , Теопод2 ; UTR, непереведенный регион; Vgt1 , Переход от вегетативного к генеративному 1 ; VRN1 , ВЕРНАЛИЗАЦИЯ1.

    Сноски

    Список литературы

    Баклер, Э. С., Холланд, Дж. Б., Брэдбери, П. Дж., Ачарья, К. Б., Браун, П. Дж., Браун, К., и др. (2009). Генетическая архитектура времени цветения кукурузы. Наука 325, 714–718. DOI: 10.1126 / science.1174276

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Цай, Х. Г., Чен, Ф. Г., Ми, Г. Х., Чжан, Ф. С., Маурер, Х. П., Лю, В. X. и др. (2012). Отображение QTL для архитектуры корневой системы кукурузы ( Zea mays L.) в поле на разных стадиях развития. Теор. Прил. Genet. 125, 1313–1324. DOI: 10.1007 / s00122-012-1915-6

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Кастеллетти, С., Тубероза, Р., Пиндо, М., и Салви, С. (2014). Вставка транспозона MITE связана с дифференциальным метилированием во время цветения кукурузы QTL Vgt1 . G3 4, 805–812. DOI: 10.1534 / g3.114.010686

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Чак, Г., Циган, А. М., Сэтерн, К., и Хейк, С. (2007a). Гетерохронный мутант кукурузы Corngrass1 является результатом сверхэкспрессии тандемной микроРНК. Nat. Genet. 39, 544–549. DOI: 10.1038 / ng2001

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Чак, Г., Мили, Р., Айриш, Э., Сакаи, Х. и Хейк, С. (2007b). МикроРНК кукурузы tasselseed4 контролирует определение пола и судьбу меристемных клеток, нацеливаясь на Tasselseed6 / неопределенный колоск 1 . Nat. Genet. 39, 1517–1521. DOI: 10.1038 / нг.2007.20

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Де Дорлодот, С., Форстер, Б., Пажес, Л., Прайс, А., Тубероза, Р., и Дрей, X. (2007). Архитектура корневой системы: возможности и ограничения для генетического улучшения сельскохозяйственных культур. Trends Plant Sci. 12, 474–481. DOI: 10.1016 / j.tplants.2007.08.012

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Дэн, В., Касао, М. К., Ван, П., Сато К., Хейс П. М., Финнеган Э. Дж. И др. (2015). Прямая связь между реакцией яровизации и другими ключевыми характеристиками зерновых культур. Nat. Commun. 6: 5882. DOI: 10.1038 / ncomms6882

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Дитц, К. Дж., Фогель, М. О., и Фиххаузер, А. (2010). Факторы транскрипции AP2 / EREBP являются частью регуляторных сетей генов и интегрируют метаболические, гормональные и экологические сигналы при адаптации к стрессу и ретроградной передаче сигналов. Protoplasma 245, 3–14. DOI: 10.1007 / s00709-010-0142-8

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Ду, Х. В., Хуанг, М., Чжан, З. X. и Ченг, С. Ю. (2014). Полногеномный анализ семейства генов AP2 / ERF при стрессовой реакции на переувлажнение кукурузы. Euphytica 198, 115–126. DOI: 10.1007 / s10681-014-1088-2

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Гу, Д. Д., Мэй, Х. П., Ю, Т. Т., Сунь, Н. Н., Сюй, Д., Лю С. и др. (2016). Идентификация QTL по признакам корня кукурузы в разных поколениях и в разных средах. Crop Sci. 57, 13–21. DOI: 10.2135 / cropci2016.01.0031

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Хаммер, Г. Л., Донг, З. С., Маклин, Г., Доэрти, А., Мессина, К., Шусслер, Дж. И др. (2009). Могут ли изменения в архитектуре растительного покрова и / или корневой системы объяснить исторические тенденции урожайности кукурузы в кукурузном поясе США? Crop Sci. 49, 299–312. DOI: 10.2135 / cropci2008.03.0152

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Хоххолдингер, Ф. (2009). «Корневая система кукурузы: морфология, анатомия и генетика» в Справочник кукурузы: ее биология . ред. Дж. Л. Беннетцен и С. К. Хейк (Нью-Йорк: Springer Science & Business Media), 145–159.

    Google Scholar

    Хоххолдингер Ф. и Тубероза Р. (2009). Генетическое и геномное вскрытие развития и архитектуры корня кукурузы. Curr. Opin.Plant Biol. 12, 172–177. DOI: 10.1016 / j.pbi.2008.12.002

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Ходж А., Берта Г., Дуссан К., Мерчан Ф. и Креспи М. (2009). Рост, архитектура и функции корней растений. Почва растений 321, 153–187. DOI: 10.1007 / s11104-009-9929-9

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Китоми Ю., Ито Х., Хобо Т., Ая К., Китано Х. и Инукай Ю. (2011). Реагирующий на ауксин фактор транскрипции AP2 / ERF CROWN ROOTLESS5 участвует в инициации корневого корня у риса посредством индукции OsRR1 , регулятора ответа типа A цитокининового сигнала. Plant J. 67, 472–484. DOI: 10.1111 / j.1365-313X.2011.04610.x

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Ку, Л. X., Сан, З. Х., Ван, К. Л., Чжан, Дж., Чжао, Р. Ф., Лю, Х. Ю. и др. (2012). QTL-картирование и анализ эпистаза признаков корневища кукурузы. Мол. Порода. 30, 697–708. DOI: 10.1007 / s11032-011-9655-x

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Ларкин, М.А., Блэкшилдс, Г., Браун, Н.П., Ченна, Р., McGettigan, P.A., McWilliam, H., et al. (2007). Clustal W и clustal X версии 2.0. Биоинформатика 23, 2947–2948. DOI: 10.1093 / биоинформатика / btm404

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Лаутер Н., Кампани А., Карлсон С., Гебель М. и Мус С. П. (2005). microRNA172 подавляет glossy15 , способствуя изменению вегетативной фазы у кукурузы. Proc. Natl. Акад. Sci. США. 102, 9412–9417. DOI: 10.1073 / пнас.0503927102

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Ли Ю., Фу Ю., Хуанг Дж., Ву К. и Чжэн К. (2011). Профилирование транскриптов на ранней стадии развития корня кукурузы с помощью секвенирования solexa. FEBS J. 278, 156–166. DOI: 10.1111 / j.1742-4658.2010.07941.x

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Li, H., Peng, Z. Y., Yang, X. H., Wang, W. D., Fu, J. J., Wang, J. H., et al. (2013). Полногеномное ассоциативное исследование анализирует генетическую архитектуру биосинтеза масла в зернах кукурузы. Nat. Genet. 45, 43 – U72. DOI: 10,1038 / нг.2484

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Ливак, К. Дж., И Шмитген, Т. Д. (2001). Анализ данных относительной экспрессии генов с использованием количественной ПЦР в реальном времени и метода 2 (-Delta Delta C (T)). Методы 25, 402–408. DOI: 10.1006 / meth.2001.1262

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Лобелл, Д. Б., Робертс, М. Дж., Шленкер, В., Браун, Н., Литтл, Б. Б., Реджесус, Р. М. и др. (2014). Повышенная чувствительность к засухе сопровождает повышение урожайности кукурузы на Среднем Западе США. Наука 344, 516–519. DOI: 10.1126 / science.1251423

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Маккарти, Д. Р., Сеттлс, А. М., Сузуки, М., Тан, Б. К., Латшоу, С., Порч, Т. и др. (2005). Стационарный мутагенез транспозонов у инбредной кукурузы. Plant J. 44, 52–61. DOI: 10.1111 / j.1365-313X.2005.02509.х

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Мидзои, Дж., Шинозаки, К., Ямагути-Шинозаки, К. (2012). Факторы транскрипции семейства AP2 / ERF в ответах растений на абиотический стресс. Biochim. Биофиз. Acta Gene Regul. Мех. 1819, 86–96. DOI: 10.1016 / j.bbagrm.2011.08.004

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Мюллер, Н. Д., Гербер, Дж. С., Мэтт, Дж., Рэй, Д. К., Навин, Р., и Фоли, Дж. А. (2012). Устранение разрыва в урожайности за счет рационального использования питательных веществ и воды Природа 494, 390–390. DOI: 10.1038 / природа11907

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Наварро, Дж. А. Р., Уиллкокс, М., Бургуэно, Дж., Ромэй, К., Свартс, К., Трахсел, С. и др. (2017). Изучение аллельного разнообразия, лежащего в основе адаптации ко времени цветения у староместных сортов кукурузы. Nat. Genet. 49, 476–480. DOI: 10,1038 / нг.3784

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Сайтоу Н. и Ней М. (1987). Метод объединения соседей — новый метод реконструкции филогенетических деревьев. Мол. Биол. Evol. 4, 406–425. DOI: 10.1093 / oxfordjournals.molbev.a040454

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Салви, С., Спонза, Г., Морганте, М., Томес, Д., Ниу, X., Фенглер, К. А. и др. (2007). Консервативные некодирующие геномные последовательности, связанные с локусом количественного признака времени цветения кукурузы. Proc. Natl. Акад. Sci. США 104, 11376–11381. DOI: 10.1073 / pnas.0704145104

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Сеттлс, А.М., Холдинг, Д. Р., Тан, Б. К., Латшоу, С. П., Лю, Дж., Сузуки, М. и др. (2007). Последовательно-индексированные мутации кукурузы с использованием популяции с метками транспозонов UniformMu. BMC Genomics 8: 116 DOI: 10.1186 / 1471-2164-8-116

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Шарони, А. М., Нуруззаман, М., Сато, К., Симидзу, Т., Кондо, Х., Сасая, Т. и др. (2011). Генные структуры, классификация и модели экспрессии семейства факторов транскрипции AP2 / EREBP в рисе. Physiol растительных клеток. 52, 344–360. DOI: 10.1093 / pcp / pcq196

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Stelpflug, S.C., Sekhon, R.S., Vaillancourt, B., Hirsch, C.N., Buell, C.R., De Leon, N., et al. (2016). Расширенный атлас экспрессии генов кукурузы на основе секвенирования РНК и его использования для изучения развития корней. Геном растений 9, 1–16. DOI: 10.3835 / plantgenome2015.04.0025

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Сузуки, М., Сато Ю., Ву С., Канг Б. Х. и Маккарти Д. Р. (2015). Консервативные функции переносчика матки big embryo1 в регуляции размера латеральных органов и скорости инициации. Растительная клетка 27, 2288–2300. DOI: 10.1105 / tpc.15.00290

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Тамура, К., Дадли, Дж., Ней, М., и Кумар, С. (2007). MEGA4: программа молекулярно-эволюционного генетического анализа (MEGA) версии 4.0. Мол. Биол. Evol. 24, 1596–1599.DOI: 10.1093 / molbev / msm092

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Тарамино, Г., Зауэр, М., Стауфер Джей, Л., Мултани, Д., Ниу, X., Сакаи, Х. и др. (2007). Ген кукурузы ( Zea mays L.) RTCS кодирует белок домена LOB, который является ключевым регулятором инициации зародышевого семенного и постэмбрионального корней, передаваемых через побеги. Plant J. 50, 649–659. DOI: 10.1111 / j.1365-313X.2007.03075.x

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Трахсель, С., Кэпплер, С. М., Браун, К. М., и Линч, Дж. П. (2011). Shovelomics: высокопроизводительное фенотипирование корневой архитектуры кукурузы ( Zea mays L.) в полевых условиях. Почва растений 341, 75–87. DOI: 10.1007 / s11104-010-0623-8

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Voss-Fels, K. P., Robinson, H., Mudge, S. R., Richard, C., Newman, S., Wittkop, B., et al. (2017). ВЕРНАЛИЗАЦИЯ1 модулирует архитектуру корневой системы пшеницы и ячменя. Мол. Завод .11, 226–229. DOI: 10.1016 / j.molp.2017.10.005

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Уоллес, Дж. Г., Брэдбери, П. Дж., Чжан, Н. Ю., Гибон, Ю., Стит, М., и Баклер, Э. С. (2014). Картирование ассоциаций по многочисленным признакам позволяет выявить закономерности функциональной изменчивости кукурузы. PLoS Genet. 10, 1–10. DOI: 10.1371 / journal.pgen.1004845

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Сюй, К.З., Тай, Х.Х., Салим, М., Людвиг, Ю., Майер, К., Berendzen, K. W., et al. (2015). Совместное действие белков домена боковых границ органов (LOB) паралогов кукурузы, RTCS и RTCL, при формировании корней на побегах. New Phytol. 207, 1123–1133. DOI: 10.1111 / Nph.13420

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Сюэ, Дж., Се, Р. З., Чжан, В. Ф., Ван, К. Р., Хоу, П., Мин, Б. и др. (2017). Прогресс исследований по сокращению полегания высокоплодородной кукурузы. J. Integr. Agric. 16, 2717–2725.DOI: 10.1016 / S2095-3119 (17) 61785-4

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Ямагути-Шинозаки, К., и Шинозаки, К. (2006). Сети регуляции транскрипции в клеточных ответах и ​​толерантности к обезвоживанию и холодовым стрессам. Annu. Rev. Plant Biol. 57, 781–803. DOI: 10.1146 / annurev.arplant.57.032905.105444

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Ян, X. Х., Гао, С. Б., Сюй, С. Т., Чжан, З. X., Прасанна, Б. М., Ли, Л. и др. (2011).Характеристика глобальной коллекции зародышевой плазмы и ее потенциальное использование для анализа сложных количественных признаков кукурузы. Мол. Порода. 28, 511–526. DOI: 10.1007 / s11032-010-9500-7

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Ян, Н., Лу, Ю. Л., Янг, X. Х., Хуанг, Дж., Чжоу, Ю., Али, Ф. и др. (2014). Полногеномные исследования ассоциации с использованием новой непараметрической модели показывают генетическую архитектуру 17 агрономических признаков в расширенной панели ассоциаций кукурузы. PLoS Genet. 10: e1004573. DOI: 10.1371 / journal.pgen.1004573

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Ю С. Д., Чо Ю. Х. и Шин Дж. (2007). Протопласты мезофилла Arabidopsis: универсальная клеточная система для анализа временной экспрессии генов. Nat. Protoc. 2, 1565–1572. DOI: 10.1038 / nprot.2007.199

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Ю. П., Балдауф Дж., Литио А., Маркон К., Нетлтон Д., Li, C., et al. (2016). Репрограммирование транскриптомов перицикла кукурузы, специфичного для типа корня, с помощью местного высокого содержания нитратов приводит к разным паттернам ветвления боковых корней. Plant Physiol. 170, 1783–1798. DOI: 10.1104 / стр.15.01885

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Ю. П., Хоххолдингер Ф. и Ли К. (2015). Пластичность корней в ответ на локализованное высокое содержание нитратов в кукурузе ( Zea mays ). Ann. Бот. 116, 751–762. DOI: 10.1093 / aob / mcv127

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Zhang, Z., Zhang, X., Lin, Z., Wang, J., Xu, M., Lai, J., et al. (2018). Генетическая архитектура числа узловых корней кукурузы. Plant J. 93, 1032–1044. DOI: 10.1111 / tpj.13828

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Zhao, Y., Cheng, S. F., Song, Y. L., Huang, Y. L., Zhou, S. L., Liu, X. Y., et al. (2015). Взаимодействие между ERF3 и WOX11 риса способствует развитию корневого корня путем регулирования экспрессии генов, участвующих в передаче сигналов цитокининов. Растительная клетка 27, 2469–2483. DOI: 10.1105 / tpc.15.00227

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Чжао, Ю., Ху, Ю. Ф., Дай, М. К., Хуанг, Л. М., и Чжоу, Д. X. (2009). Родственный WUSCHEL ген Homeobox WOX11 необходим для активации побегового развития корневого корня риса. Растительная клетка 21, 736–748. DOI: 10.1105 / tpc.108.061655

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Цзо, В. Л., Чао, К., Чжан, Н., Йе, Дж. Р., Тан, Г. К., Ли, Б. Л. и др. (2015). Киназа, связанная со стенкой кукурузы, обеспечивает количественную устойчивость к головне. Nat. Genet. 47, 151–157. DOI: 10,1038 / нг. 3170

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    .

    Оставьте комментарий